تخلیص ویتلوژنین فیل‌ماهی (Huso huso) با استفاده از روش ترکیبی رسوب‌دهی انتخابی (EDTA-Mg2+) و استخراج از ژل

Abstract

ویتلوژنین یک گلیکو فسفو لیپو پروتئین پیش‌ساز پروتئین‌های زرده است که نقش اصلی را در مرحلة زرده‌سازی بر عهده دارد. سطوح این پروتئین در ماهیان نابالغ و جنسیت نر به‌منزلة شاخص مواجهة ماهی با ترکیبات اخلال‌گر سیستم درون‌ریز استفاده می‌شود. هدف از این مطالعه شناسایی و تخلیص ویتلوژنین فیل‌ماهی (<em>Huso huso</em>) با استفاده از روش رسوب‌دهی انتخابی و استخراج از ژل است. در مطالعة حاضر، نمونه‌های پلاسمای مورد نیاز از فیل‌ماهیان ماده در مرحلة زرده‌سازی تهیه و ویتلوژنین با استفاده از ویژگی‌های خاص این پروتئین (محدودة وزن مولکولی، اختصاصی‌بودن برای جنسیت ماده، قابلیت القا از طریق استروژن‌ها، رسوب این پروتئین در حضور EDTA، همچنین واکنش اختصاصی با آنتی‌بادی ویتلوژنین فیل‌ماهی) شناسایی شد. ویتلوژنین فیل‌ماهی با استفاده از روش‌های رسوب‌دهی انتخابی ویتلوژنین (EDTA-Mg⁺²) و استخراج از ژل preparative با درصد خلوص بالا تخلیص شد. نتایج فرایند تخلیص این پروتئین را در شرایط احیایی به صورت یک باند منفرد و با وزن مولکولی حدود KDa 200 نشان داد. بر اساس نتایج، روش ترکیبی رسوب‌دهی انتخابی ویتلوژنین و استخراج از ژل preparative کارایی بسیار مناسبی در شناسایی و تخلیص ویتلوژنین فیل‌ماهی دارد.