مطالعه ساختار و فعالیت آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گاوی در حضور داروی آلوپورینول

Abstract

ریبونوکلئاز پانکراس گاوی نوع(A) یک آنزیم اندوریبونوکلئاز است و نقش آن شکستن پیوندهای شیمیایی فسفودی استر در ساختمان RNAتک رشته ای طی یک واکنش دو مرحله ای می باشد. مرحله ی اول این واکنش آنزیمی یک واکنش ترانس فسفریلاسیونو مرحله ی دوم آن، یک واکنش هیدرولازی (آبکافت) است. آلوپورینول ایزومر ساختاری هیپوگزانتین (یکی از پورین های طبیعی بدن) می باشد که با مهار آنزیم گزانتین اکسیداز تولید اسید اوریک را کاهش می دهد ویکی از داروهای پرمصرف در درمان نقرس است. این دارو به علت داشتن ساختار نوکلئوتیدی ممکن است بر روی ساختار و فعالیت آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گاوی مؤثر باشد.با توجه به اهمیت آنزیم های ریبونوکلئاز درتجزیه انواع مولکول های RNAبرای حفظ تعادل سیستم سلولی، باید تأثیر انواع مولکول های زیستی و داروهایی را که ممکن است بر روی فعالیت این آنزیم اثرگذار باشند بررسی کرد. بنا بر این در تحقیق حاضر تأثیر این آلوپورینول در غلظت های مختلف بر روی ساختار و فعالیت آنزیم ریبونوکلئاز پانکراس گاو بررسی می شود. در ابتدا منحنی اشباع آنزیم در حضور سوبسترای cCMPرسم شد. سپس اثر آلوپورینول در محدوده غلظتی 5-0 و 1-0 میلی مولار بر روی سرعت بیشینه آنزیم بررسی شد و پس از آن منحنی اشباع آنزیم در حضور چند غلظت از دارو رسم شد. نتایج نشان دادند که دارو در غلظت های استفاده شده باعث کاهش فعالیت آنزیم می شود. سپس بررسی ساختار آنزیم با استفاده از مطالعات اتصال لیگاند و دو رنگ نمایی دورانی انجام شد که نتایج نشان داد که آلوپورینول باعث تغییر ساختار آنزیم نیز می شود. در مجموع می توان گفت این دارو به احتمال قوی اثر مهارکنندگی بر فعالیت آنزیم ریبونوکلئاز Aدارد.