بررسی و مقایسه میزان مهار ژن CERB با استفاده از دو siRNA اختصاصی آن در رده سلولی HeLa

Abstract

پروتئین CREBیک فاکتور مهم پایین دست بسیاری از مسیرهای سیگنالی به شمار می رود. با داشتن siRNAکارآمد برای ژن CREBمی توان مسیر های سیگنالی بسیاری از داروها را در سلول های مختلف بررسی نمود. در این تحقیق میزان مهار بیان ژن CREBبا بکارگیری دو siRNA مختلف برای این ژن در سلول های HeLaمورد بررسی قرار گرفت. جهت بررسی میزان مهاری دو siRNACREB، سلول های HeLaبا روش Lipofection ترانسفکت شدند. استخراج RNAوسنتز cDNAصورت گرفته، بررسی اثر مهاری بیان ژن CREBبا استفاده از Relative Quantitative Real time PCRانجام گرفت طبق نتایج به دست آمده یکی از siRNAها اثر مهاری بالایی برروی بیان CREBدر سلول های HeLaنشان داد، و بیان ژن CREB، 5/64درصد در این سلول ها کاهش یافت. بر اساس نتایج این تحقیق، siRNACREBبا کارایی بالا توانست اثر مهاری را در سلول های HeLaنشان دهد.با استفاده از siRNAکارآمدی که در این تحقیق جهت مهار ژن CREBطراحی و در سلول های HeLaاستفاده گردید، می توان از CREB siRNAدر سلول های دیگر جهت بررسی مسیر سیگنالی نیز استفاده نمود.