جداسازی زیرگروه B-1 لنفوسیت های B از خون بند ناف انسان

Abstract

مقدمه: لنفوسیت های B1 با دارا بودن عرضه بالایی از مارکر CD5، توانایی تمایز و تغییر شکل به سلول‌های شبه ماکروفاژی تحت عنوان سلول‌های B‏-1 را دارند. هدف از انجام این مطالعه، امکان جداسازی و تخلیص این رده منحصر به فرد از تشکیلات سلولی خون بند ناف می‌باشد. روش کار: 14 نمونه بند ناف نوزادان سالم از زایمان طبیعی یا سزارین انتخابی مورد استفاده قرار گرفتند. با استفاده از هیدروکسی اتیل استارچ و یا ژلاتین 3% گلبول‌های سفید از گلبول‌های قرمز تفکیک شدند. کشت سلولی برای جدا سازی سلول‌های چسبنده از غیر چسبنده انجام شد. رده های سلولی لنفوسیتی خون بند ناف از محتویات باقی مانده لکوسیتی با استفاده از گرادیان غلظتی ماده فایکول و سانتریفوژ جداسازی شدند. به منظور ارزیابی مرحله تخلیص از آزمایش روزت لنفوسیتی استفاده شد. یافته‌ها: با وجود عدم تفاوت بین شمارش سلولی در دو ماده رقیق سازی خون، میزان حیات سلول‌ها در روش هیدروکسی اتیل استارچ پایین‌تر از 87% است، در حالی که در روش رقیق سازی به کمک ژلاتین 3% فعالیت حیاتی سلول‌ها بین 90-95% محاسبه شد. نتایج آزمایش روزت لنفوسیتی نشان می‌دهد که میزان خالص سازی سلول‌های B-1 با روش فوق به میزان تقریبی 99% است. نتیجه گیری: این فرایند نشان می‌دهد بیش‌تر سلول‌های B استخراج شده از خون بند ناف انسان از نوع سلول‌های B-1 می‌باشند و فرآیند ژلاتین 3% بهترین و مناسب‌ترین روش با در نظر گرفتن تعداد و میزان حیات سلول‌ها است.