جداسازی ژن‌های بتا1 و3- گلوکاناز از یونجه یکساله، بیان آنها در باکتری BL21 E.coli و بررسی خاصیت ضد قارچی پروتئین های بیان شده

Abstract

پروتئین های مرتبط با بیماریزایی (Pathogenesis-related protein) آن دسته از ترکیبات پروتئینی هستند که توسط گیاه میزبان در پاسخ به حمله عوامل بیماری‌زا یا تنش‌های محیطی تولید می شوند. تاکنون بتا1 و3-گلوکانازهای زیادی در گیاهان مختلف شناسایی شده است که خاصیت ضد قارچ آنها در شرایط آزمایشگاه بررسی شده است. هدف این تحقیق جداسازی ژن های بتا1و3- گلوکاناز یونجه یکساله، کلون ژن‌ها، بیان فراوانی و بررسی فعالیت های فیزیولوژیک و خاصیت ضد قارچ پروتئین های به دست آمده در شرایط آزمایشگاه می باشد. در این تحقیق با همردیف سازی ژن های بتا1 و3-گلوکاناز یونجه چند ساله و نخود روی ژنوم یونجه یکساله سه چارچوب خواندن با شباهت بالای 50% و دارا بودن رمز شروع و پایان، شناسایی و جداسازی شده و قطعات به ناقل PET21c منتقل و در باکتری BL21 <em>E.coli</em> بیان شد. با تکنیک SDS-PAGE مشخص شد که این پروتئین ها به صورت اجسام نا محلول تولید شده اند. خاصیت ضد قارچی این پروتئین ها پس از تا شدن و به دست آوردن ساختار فضایی صحیح روی قارچ های <em>Alternaria alternata</em> و <em>Fusarium graminearum </em>آزمایش شد. نتایج آزمون بررسی خاصیت ضد قارچ پروتئین ها پس از تجزیه و تحلیل آماری با نرم افزار SAS در سطح 5% معنی دار بود.