بهینه‌سازی شرایط PCR برای دو ژن CHD-W و CHD-Z جهت تفکیک جنسیت در قناری

Abstract

در گونه‌های بسیاری از پرندگان من جمله قناری‌ها، جنس نر و ماده قبل از بلوغ فاقد هر گونه تفاوت در شکل ظاهری می‌باشند. از آنجاییکه صدای دلنشین قناری توسط جنس نر ایجاد می‌شود، لذا تفکیک جنسیّت قناری‌ها قبل از بلوغ از لحاظ اقتصادی بسیار حائز اهمّیّت می‌باشد. ژن‌های موجود بر کروموزوم‌های جنسی به خاطر منحصر به جنس بودنشان می‌توانند برای تفیین جنسیت به روش مولکولی مورد استفاده قرار گیرند. با استفاده از روش PCR و بر اساس دو ژن CHD-W و CHD-Z تفکیک جنسیّت در قناری‌ها صورت گرفته است. هدف از این مطالعه بهینه سازی PCR بر اساس دو ژن CHD-W و CHD-Z در تفکیک جنسیّت در قناری بود. در این مطالعه از 24 قناری دو پر حاوی ریشه تهیه گردید و استخراج DNA از بالب پرها صورت پذیرفت و از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده برای تکثیر توالی ژن W-CHD استفاده شد و با بهینه سازی شرایط PCR برنامه بهینه به صورت زیر به دست آمد: واسرشته سازی اوّلیه 94 درجه سانتیگراد به مدّت 5 دقیقه، 35 سیکل با شرایط : 94 درجه سانتیگراد به مدّت 60 ثانیه ،58 درجه سانتیگراد به مدّت 35 ثانیه و دمای 72 درجه سانتیگراد به مدّت 50 ثانیه و در نهایـت دمـای72 درجه سانتیگراد بـه مـدت 5 دقیقه. این مطالعه نشان داده شد که روش بهینه شده PCR می‌تواند با دقت صد درصد جنسیت قناری را تعیین کند و لذا مناسب‌ترین روش برای تعیین جنسیّت قناری است.