تشخیص و آنتی بیوگرام استافیلوکوکوس ارئوس در نمونه‌های شیر غیر پاستوریزه استان تهران به روش‌ Multiplex PCR ‌ و مقایسه با کشت میکروبی

Abstract

باکتری استافیلوکوکوس ارئوس از شایع‌ترین باکتری‌های عامل ورم پستان می‌باشد که جهت تشخیص تعداد کم آن در شیر نیاز به روش‌های حساس می‌باشد. در این مطالعه روش از واکنش زنجیره‌ای پلی مراز برای تشخیص ژن‌های تولید کننده توکسین‌های SEA، SEB، SEC که مختص گونه ارئوس بوده و همچنین ژن حراست شده S rRNA23 که در تمام استافیلوکوک‌ها مشترک می‌باشد، استفاده شده است. در نهایت نتایج حاصل از تشخیص ملکولی با روش مرسوم کشت مورد مقایسه قرار گرفته است. ‌ به دلیل سختی دیواره باکتری استافیلوکوکوس و عدم تأثیر آنزیم‌های لایزوزیم، پروتئناز K و موتیلایزین، از روش ازت مایع جهت تجزیه دیواره باکتری استفاده گردید. تعداد 48 نمونه شیرغیر پاستوریزه از دامداری‌های حومه استان تهران تهیه و بعد از انجام PCR و کشت بر روی محیط آگار خون دار تعداد 4 نمونه مثبت تشخیص داده شد. نتایج حاصل از آنتی بیوگرام نشان داد که سیپروفلوکساسین، ریفامپین و جنتامایسن بهترین آنتی بیوتیک‌های انتخابی در درمان اورام پستانی ناشی از استافیلوکوکوس طلائی می‌باشد. حساسیت روش ملکولی با تعداد 10 باکتری در هر میلی لیتر از محیط کشت در مدت زمان کوتاهی بدست آمد در حالیکه در روش کشت، تعداد 100 باکتری بعد از مدت 48 ساعت قابل تشخیص بود. بیان کننده آن است که روش ملکولی در مقایسه با روش‌های مرسوم حساس و بسیار سریع می‌باشد.