| dc.contributor.author | ناصرلی, سولماز | fa_IR |
| dc.contributor.author | زهرایی صالحی, تقی | fa_IR |
| dc.contributor.author | نیری فسایی, بهار | fa_IR |
| dc.contributor.author | سعیدی نیا, علیرضا | fa_IR |
| dc.contributor.author | اشرافی تمامی, ایرج | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 1399-08-01T00:50:59Z | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 2020-10-22T00:51:00Z | |
| dc.date.available | 1399-08-01T00:50:59Z | fa_IR |
| dc.date.available | 2020-10-22T00:51:00Z | |
| dc.date.issued | 2015-09-23 | en_US |
| dc.date.issued | 1394-07-01 | fa_IR |
| dc.date.submitted | 2015-04-18 | en_US |
| dc.date.submitted | 1394-01-29 | fa_IR |
| dc.identifier.citation | ناصرلی, سولماز, زهرایی صالحی, تقی, نیری فسایی, بهار, سعیدی نیا, علیرضا, اشرافی تمامی, ایرج. (1394). طراحی و ایجاد موتاسیون در ژن wbk A بروسلا آبورتوس S19 به روش Overlap Extension PCR. مجله تحقیقات دامپزشکی (Journal of Veterinary Research), 70(3), 317-323. doi: 10.22059/jvr.2015.55276 | fa_IR |
| dc.identifier.issn | 2008-2525 | |
| dc.identifier.issn | 2251-6190 | |
| dc.identifier.uri | https://dx.doi.org/10.22059/jvr.2015.55276 | |
| dc.identifier.uri | https://jvr.ut.ac.ir/article_55276.html | |
| dc.identifier.uri | https://iranjournals.nlai.ir/handle/123456789/448518 | |
| dc.description.abstract | زمینه مطالعه: ایجاد موتاسیون در جایگاه اختصاصی میتواند یکی از روشهای کارآمد جهت بررسی ویژگی و خواص تنظیمی ژنهای گوناگون باشد. ﺑﺮوﺳﻠﻮز از ﻣﻬﻢ ﺗﺮﯾﻦ ﺑﯿﻤﺎریهای ﻋﻔﻮﻧﯽ ﻣﺸﺘﺮک ﺑﯿﻦ اﻧﺴﺎن و دام اﺳﺖ ﻛﻪ ﻣﻨﺠﺮ ﺑﻪ بروز ﺿﺮرهاى اﻗﺘﺼﺎدى ﻓﺮاواﻧﻰ ﻣﻰ ﺷﻮد. ﺑﻨﺎﺑﺮاﯾﻦ ﺷﻨﺎﺳﺎﯾﯽ ﻋﻮاﻣﻞ پاتوژن و اﯾﻤﻨﯽ زا در جنس ﺑﺮوﺳﻼ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان راهگشای ﺟﻬﺖ ﮐﻨﺘﺮل اﯾﻦ ﻣﻌﻀﻞ ﺑﻬﺪاﺷﺘﯽ ﻣﻄﺮح ﻣﯽﺑﺎﺷﺪ. هدف: با توجه به اهمیت جهش هدفدار در شناسایی ساختار ژنوم و وجود روشهای متعدد جهت دست یابی به این هدف، روش Overlap Extension PCR به عنوان یک تکنیک اصلاح شده جهت حذف و جایگزینی ژن هدف معرفی میشود. روش کار: جهت انجام این تحقیق، با انجام دو مرحله PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی، قطعات بالادست و پایین دست ژن هدف از ژنوم باکتری و کاست مقاومت آنتی بیوتیکی از پلاسمیدa(+)رpET28، تکثیر یافته و به یکدیگر اتصال یافتند. قطعه حاصله با استفاده از آنزیمهای محدودالاثر که توالی آنها در انتهای ´5 پرایمرهای خارجی قرار داده شده است، در جایگاه اختصاصی از پلاسمید (-) pBluescriptIISKهمسانه سازی شده و پس از حصول اطمینان از عدم ایجاد جهش خودبخودی در حین مراحل PCR، با استفاده از روش الکتروپوریشن به داخل ژنوم <em>بروسلا آبورتوس</em> انتقال یافت. نتایج: همسانه سازی محصول PCR اتصالی که بدون بروز تغییر در توالی نوکلئوتیدی حاصل شده بود، داخل پلاسمید (-) pBluescriptIISK انجام شد و پس از انتقال الکتریکی پلاسمید به ژنوم <em>بروسلا آبورتوس</em>، طی عمل ریکامبینیشن باعث جهش در ژن مورد نظر گردید. نتیجه گیری نهایی: نتایج این مطالعه نشان میدهد که Overlap Extension PCR یک تکنیک بهینه و اصلاح شده به منظور ایجاد جهش در ساختار ژنوم باکتری بوده و به راحتی میتواند در خانواده بروسلا استفاده گردد. | fa_IR |
| dc.format.extent | 1078 | |
| dc.format.mimetype | application/pdf | |
| dc.language | فارسی | |
| dc.language.iso | fa_IR | |
| dc.publisher | دانشگاه تهران | fa_IR |
| dc.publisher | دانشگاه تهران | en_US |
| dc.relation.ispartof | مجله تحقیقات دامپزشکی (Journal of Veterinary Research) | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | Journal of Veterinary Research | en_US |
| dc.relation.isversionof | https://dx.doi.org/10.22059/jvr.2015.55276 | |
| dc.subject | بروسلا آبورتوس | fa_IR |
| dc.subject | جهش | fa_IR |
| dc.subject | overlap extension PCR | fa_IR |
| dc.title | طراحی و ایجاد موتاسیون در ژن wbk A بروسلا آبورتوس S19 به روش Overlap Extension PCR | fa_IR |
| dc.type | Text | en_US |
| dc.contributor.department | گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران | fa_IR |
| dc.citation.volume | 70 | |
| dc.citation.issue | 3 | |
| dc.citation.spage | 317 | |
| dc.citation.epage | 323 | |