تشخیص و تفریق اولیه تعدادی از جدایه‌های مایکوپلاسما سینوویه ایران به روش PCR براساس تکثیر بخشی از ناحیه انتهایی 5‌ژن VlhA

Abstract

مایکوپلاسما سینوویه بعنوان یک عامل بیماریزای دخیل در عوارض تنفسی و لنگش، خسارات اقتصادی قابل توجهی را متوجه صنعت طیور در ایران می‌سازد. لذا تشخیص سریع وقطعی آلودگی و نیز تفریق سویه‌ها از ابزارهای کلیدی در پیشگیری و کنترل می‌باشد. هدف از این مطالعه جداسازی میکروارگانیزم و تشخیص، شناسایی و نیز تفریق سویه‌های رایج درایران بویژه سویه‌های فیلد و واکسن به‌روش مولکولی بود. از 11 مرغداری در مناطق مختلف کشور هرکدام تعداد 20 نمونه خون جهت آزمایش تست سریع آگلوتیناسیون و الایزا‚10 نمونه سواب نای وشکاف کامی وبافت بمنظور کشت و نیز 9 نمونه سوا ب جهت آزمایش ‌ PCR اخذ گردید. بمنظور تشخیص این میکروارگانیزم بروش مولکولی ،علاوه بر پرایمرهای srRNA16،برای اولین بار در کشور ازجفت پرایمر مربوط به انتهای آمینی ژن VlhA استفاده گردید. نتایج حاصله از روش PCR با استفاده از جفت پرایمر اخیر نشان داد که علاوه بر امکان شناسایی گونه مایکوپلاسما سینوویه در مورد نمونه‌های مورد آزمایش، اندازه محصول PCR بدست آمده در سویه‌های مختلف شامل جدایه‌های بدست آمده، سویه استاندارد و سویه واکسن بین 350 تا400 جفت باز متفاوت بود. مقایسه نتایج این روش با روشهای سرولوژی و جداسازی و نیز روش PCR معمول با استفاده از پرایمرهای مربوط به ژن srRNA16 از یکسو و نیز اختلاف اندازه در باندهای ایجاد شده در سویه‌های مختلف از سوی دیگر دلالت بر آن دارد که روش PCR با ...