تولید پروتئینهای نوترکیب فسفولیپاز D و پروتئین شوک حرارتی کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس

Abstract

<strong>زمینه مطالعه:</strong> بیماری لنفادنیت پنیری ناشی از <em>کورینه</em><em>‌</em><em>باکتریوم سودوتوبرکلوزیس</em> یکی از مهم‌ترین بیماری‌های گوسفند و بز است که منجر به ضرر‌های اقتصادی دام‌پروران می‌شود. فسفولیپاز Dا(PLD) این باکتری یک اگزوتوکسین قوی است که به‌عنوان یک عامل حدت اصلی آن در نظر گرفته می‌شود و احتمالاًً در انتشار باکتری از محل عفونت به سایر قسمت‌های بدن میزبان مشارکت دارد. پروتئین‌های شوک حرارتی (HSPs) کاندیدا‌های خوبی برای تهیه واکسن‌ها هستند چون هم ایمنی هومورال و هم ایمنی سلولی را تحریک ‌می‌کنند. <strong>هدف: </strong>مطالعه حاضر باهدف تولید پروتئین‌های نوترکیب PLD و HSP₆₀ <em>کورینه</em><em>‌</em><em>باکتریوم سودوتوبرکلوزیس</em> جهت فراهم شدن زمینه‌ی بررسی توان محافظت‌کنندگی و ساخت واکسن ضد این باکتری صورت گرفت. <strong>روش کار:</strong> ژن‌های PLD و HSP₆₀، در پلاسمید pMAL-c2X کلون گردیدند و در <em>اشرشیا</em><em>‌</em><em>کلی</em> سویه DH5 ترانسفورمه شدند. بیان پروتئین‌ها با استفاده از روش SDS-PAGE بررسی‌شده و صحت ردیف نوکلئوتیدی محصولات کلون شده با تعیین توالی نوکلئوتیدی مورد تأیید قرار گرفتند. <strong>نتایج:</strong> نتایج نشان داد که <em>اشرشیا</em><em>‌</em><em>کلی</em> سویه DH5 ترانسفورمه شده به‌خوبی پروتئین‌های فوق را بیان می‌نماید. پروتئین‌های نوترکیب بیان‌شده تقریباً به‌طور کامل محلول بودند. <strong>نتیجه</strong><strong>‌</strong><strong>گیری نهایی: </strong>با توجه به امکان تولید پروتئین‌های نوترکیب فوق، در مطالعات بعدی می‌توان ایمنی‌زایی و محافظت‌کنندگی آن‌ها در برابر عفونت‌های ناشی از <em>کورینه باکتریوم سودوتوبرکلوزیس </em>را موردسنجش قرارداد.