مطالعه ترمودینامیکی پایانه کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم تیپ E با روش طیف سنجی دورنگ نمایی دورانی

Abstract

به‌منظور پیشگیری از سندروم بوتولیسم، به‌تازگی محققین به استفاده از واکسن‌های نوترکیب توجه خاصی نشان داده‌اند. یکی از این واکسن-ها، پروتئین نوترکیب حاوی 93 اسید آمینه انتهای کربوکسیلی نوروتوکسین بوتولینوم تیپ E (rBoNT/E-HCC) است. در این تحقیق پس از بیان و تخلیصrBoNT/E-HCC، به بررسی اثر pH‌ بر این پروتئین توسط طیف‌سنجی دورنگ نمایی دورانی (Circular Dichroism, CD) پرداخته شده و به دنبال آن مطالعات ترمودینامیکی به‌منظور یافتن شرایط بهینه تخلیص و سنجش امکان استفاده از این کاندید، واکسن به‌صورت خوراکی مورد بررسی قرار گرفته است. بدین منظور واسرشتگی حرارتی rBoNT/E-HCC در چهار pH مختلف (2، 5، 4/7 و9) توسط CD مورد بررسی قرار گرفته است. نتایج نشان داده که Tm و ∆G° پروتئین rBoNT/E-HCC در pHهای بازی نسبت به pH‌های اسیدی بالا‌تر است. در نتیجه یافته‌های این تحقیق، بهترین شرایط تخلیص برای پروتئین rBoNT/E-HCC، شرایط با pH خنثی یا باز می‌باشد.