القای فیبریل‌زایی در سرم آلبومین گاوی و تولید رشته‌های آمیلوئیدی به منظور استفاده از آنها به‌عنوان نانو ماده زیستی جدید

Abstract

<br />رشته­های آمیلوئیدی دسته­ای از نانو رشته­های پروتئینی هستند که در آن پروتئین طبیعی به رشته­های متراکم تبدیل شده­اند. تجمع می­تواند بیماریزا و یا غیر­بیماریزا باشد. اخیرا این رشته­ها با توجه به ساختار منحصر به فردی که دارند، برای تولید نانومواد زیستی مورد توجه قرار گرفته­اند. در این مطالعه از آلبومین سرم گاوی به‌عنوان یک پروتئین مدل برای بهینه‌سازی فرایند فیبریل زایی استفاده شد. غلظت­های 2-10 میلی‌گرم بر میلی­لیتر در بافر با pHهای مختلف 3-7 تهیه­شده و برای دوره‌های صفر تا 48 ساعت در دمای 30-70 درجه سانتی­گراد قرار گرفتند و میزان تولید رشته­های آمیلوئیدی با روش اسپکتروفوتومتری، فلوریمتری و دورنگ نمایی دورانی بررسی شد. طیف­های حاصل از روش جذب­سنجی کنگورد بر اساس میزان طول موج ماکزیمم و جذب در طول موج ماکزیمم با نمونه حاوی رنگ کنگورد مقایسه شد. غلظت 10 میلی­گرم بر میلی­لیتر از پروتئین که برای 48 ساعت در بافر با 4pH= و در دمای 50 درجه سانتی­گراد قرار داشتند، بیشترین میزان آمیلوئید را تولید کردند. شرایط بهینه با روش فلورسانس ThT و دورنگ نمایی در غلظت 10 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر، 4pH=، دمای 70 درجه سانتی‌گراد و زمان 48 ساعت به­دست آمد. حضور رشته­ها با تصاویر میکرسکوپ الکترونی گذاره تأیید شد. ساختار نامحلول و ابعاد رشته­های آمیلوئیدی آنها را به‌عنوان نانو مواد زیستی جدید معرفی می­کند. بهینه‌سازی تولید این ساختارها، مجال تولید آنها را در مقیاس­های بالاتر فراهم می­آورد.