بررسی میزان بیان تعدادی از ژن‎های دخیل در سرطان در چند رده سلول سرطانی مختلف به روش RT-PCR

Abstract

چکیده <br />فرم تغییریافته و یا جهش‎یافته ژن‎ها یا همان پروتو انکوژن‎ها، مسئول ترویج رشد و تکثیر کنترل‎نشده سلولی می‎باشند. تجمع جهش در ژن‎های مختلف و خاص، در طول زمان منجر به سرطان می‎شود. الگوی بیان ژن (امضا مولکولی)، برای هر کلاس از سلول‎های توموری اختصاصی است. این مقاله آخرین روش نظارت بر بیان یک پانل از ژن‎های خاص سرطانی را شرح می‎دهد. روش real-time PCR براساس عملکرد کمی رنگ SYBR GReen، به‎طور وسیعی برای پروفایل ژن استفاده می‎شود. این روش آسان و مقرون به­صرفه است و تنها بر روی ژن‎های مورد نظر تمرکز می‎کند. در این مطالعه میزان بیان ژن‎های موردنظر ما در پنج رده سلول‎های سرطانی انسانی به طور کمی اندازه‎گیری شد. ما ژن بتا-اکتین را به­عنوان ژن مرجع در نظر گرفتیم. سلول‎ها لیز شدند و mRNA با استفاده از کیت RNA Purification و ستون­هایspin QIAGEN RNeasy استخراج گردید. رشته اول cDNA با استفاده از کیتHigh capacity cDNA Reverse transcription سنتز و میزان بیان ژن‎ها به وسیله دستگاهreal-timePCR AB step one plus اندازه گیری شد.به طور خلاصه بیان ژن p53 در هر دو رده سلول سرطان پستان، MCF7 و T47-D و سرطان ریه، A549 بالا بود. بیان src در رده سرطان پروستات، PC3 بالاتر بود. همین‎طور SKOV3 (سرطان تخمدان) بیان بالای ژن HER-2 را نشان داد. نتایج به وضوح نشان می‎دهد که الگوی بیان این پانل از ژن‎ها، در هر رده سلولی تقریباً منحصر به فرد است .