ارزیابی توان آنتاگونیستی سودوموناس‌های فلورسنت ریزوسفر سیب‌زمینی در کنترل Ralstonia solanacearum در شرایط گلخانه

Abstract

این پژوهش، با هدف ارزیابی توان آنتاگونیستی باکتری‌های <em>Pseudomonas fluorescent</em> علیه <em>Ralstonia</em> <em>solanacearum</em> عامل پژمردگی باکتریایی سیب‌زمینی در گلخانه انجام شد. تعداد 80 استرین سودوموناس روی محیط کشت King^,s B از خاک پیرامون ریشه و غده سالم گردآوری شده از 10 مزرعه جدا شد. باکتری<em>R.</em> <em>solanacearum</em> از سیب‌زمینی آلوده روی محیط کشت اختصاصی دارای تری فنیل تترازولیوم کلراید (TTC) جداسازی شد. توانایی استرین‌های باکتری‌های <em>P. fluorescent</em> در جلوگیری از رشد بیمارگر با استفاده از آزمون کشت سه نقطه‌ای و اندازه‌گیری هاله بازدارنده در قالب طرح کاملاً تصادفی با سه تکرار بررسی شد. نتایج نشان داد که استرین‌های EH87، EH203 با میانگین قطر هاله بازدارنده 3.78 و 3.65 سانتی‌متر و استرین‌های EH27 و EH40 با میانگین قطر هاله بازدارنده 1.85 و 1.54 سانتی‌متر به ترتیب بیشترین و کمترین درصد بازدارندگی از رشد را نشان دادند. بر مبنای نتیجه آزمایش بازدارندگی در آزمایشگاه از میان استرین‌های بررسی شده، تعداد نه استرین به عنوان نماینده برای بررسی‌های گلخانه‌ای انتخاب شدند. نتایج تعیین ویژگی‌های فنوتیپی و واکنش فوق حساسیت در بر‌گ‌های توتون نشان داد که این نه استرین به گونه‌های <em>Pseudomonas putida</em> و بیووارهای یک، دو و چهار<em>P</em>. <em>fluorescens</em> تعلق دارند. توان آنتاگونیستی استرین‌های سودوموناس‌های فلورسنت علیه باکتری<em>R.</em> <em>solanacearum</em> در شرایط گلخانه با روش آغشته‌سازی نشاء در قالب طرح بلوک کامل تصادفی با سه تکرار بررسی و فاکتور‌های رشد پس از سه ماه اندازه‌گیری و ثبت شد. نتایج نشان داد که استرین‌های EH70، EH49 کارایی بیوکنترلی بالایی نسبت به شاهد آلوده داشته و توانستند به ترتیب میزان بیماری را 84 و 75 درصد کاهش دهند. ژن‌های کد کننده 16SrRNA استرین‌های برگزیده با استفاده از پرایمرهای همگانی توسط PCR تکثیر و سپس توالی یابی شد. نتایج نشان داد که استرین EH53، 98 درصد به باکتری‌های، <em>Pseudomonas</em> <em>fluoresent</em> شباهت دارد.