انتقال ژن pgip1 لوبیا رقم دانشجو به کلزا (رقم R line Hyola 308) جهت ایجاد مقاومت علیه قارچ Sclerotina sclerotiorum عامل پوسیدگی ساقه

Abstract

یکی از روش‌های ممانعت از نفوذ قارچ‌های بیماریزا به درون گیاهان، مهار فعالیت آنزیم‌های پکتینازی (مانند پلی‌گالاکتوروناز) این قارچ‌ها می‌باشد. پروتئین‌های مهارکننده فعالیت آنزیم پلی‌گالاکتوروناز (PGIP) از جمله پروتئین‌هایی هستند که توسط برخی از گیاهان بیان می‌شوند و قادرند قدرت نفوذ قارچ به گیاه را مهار نمایند. در این تحقیق جهت ایجاد مقاومت به قارچ Sclerotina sclerotiorum در گیاه کلزا، ژن pgip1 به این گیاه منتقل گردید و میزان مقاومت آن مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور ابتدا ژن pgip1 لوبیا رقم دانشجو در ناقل بیانی pBI121 تحت پیشبرنده CaMV 35S کلون و با استفاده از الگوی PCR و هضم آنزیمی مورد تأئید قرار گرفت. جهت انتقال ژن به گیاه از باکتری Agrobacterium tumefaciens سویه LBA4404 و ریزنمونه‌های کوتیلدونی استفاده گردید. جهت تأئید گیاهان تراریخت به دست آمده از الگوی PCR با استفاده از آغازگرهای اختصاصی استفاده گردید. ارزیابی مقاومت گیاهان تراریخت در برابر قارچ S. sclerotiorum به روش detached leaf assay انجام گرفت. آنالیز نتایج به دست آمده نشان داد که گیاهان تراریخت احتمالی، نسبت به گیاه شاهد (کلزای غیر تراریخت) در برابر قارچ S. sclerotiorum از مقاومت بیشتری برخوردار می‌باشند.