تشخیص مولکولی گونه‌های Mycosphaerella ایجادکننده بیماری مرکب سیگاتوکا با استفاده از آغازگرهای اختصاصی

Abstract

بیماری سیگاتوکای موز یک بیماری مرکب می‎باشد که سه گونهM. musicola, M. fijiensis و M. eumusae بعنوان عوامل اولیه ایجادکننده این بیماری به شمار می‎روند. شناسایی کلاسیک این سه گونه به خاطر همپوشانی علایم بیماری، عدم وجود تفاوت مورفولوژیک بارز در مرحله تلئومورف و عدم اسپورزایی آنها روی محیط‎های کشت مصنوعی مشکل می‎باشد. پراکنش دقیق گونه‌های فوق و اپیدمیولوژی این بیماری هنوز به طور کامل مشخص نگردیده است. علاوه بر این، دو گونه M. fijiensis و M. eumusae در بسیاری از کشورهای تولیدکننده موز حضور نداشته و گونه‎های قرنطینه‌ای به حساب می‎آیند. بنابراین، شناسایی سریع و دقیق آنها جهت به کار‌گیری استراتژی مناسب مدیریتی ضروری به نظر می‎رسد. در تحقیق حاضر آغازگر‌های اختصاصی برای هریک از گونه‎های فوق بر اساس توالی بخشی از ژن کدکننده اکتین طراحی گردیدند که به ترتیب قطعاتی به طول‎های 500 جفت باز (. fijiensis M)، 200 جفت باز (musicola M.) و 630 جفت باز (M. eumusae) را تکثیر کردند. کارآیی آغازگرهای اختصاصی هرگونه روی DNA استخراج شده از کشت‎های خالص و بافت‎های برگ‎های آلوده گیاه میزیان، آزمایش و تأیید شدند. نتایج حاصل از بررسی میزان حساسیت آغازگر‌ها نشان داد که آغازگرهای اختصاصی طراحی شده برای هر یک از گونه‎های M. Musicola، M. fijiensis و M. eumusae به ترتیب توانایی تکثیر قطعه مورد نظر با غلظت‎های 100، 10 و یک پیکوگرم DNA از گونه هدف را دارا هستند.