تشخیص گونه مایکوپلاسما سینوویه در نمونه‌های بالینی با استفاده از روش VlhA-PCR

Abstract

<em>مایکوپلاسما سینوویه</em> به عنوان یکی از اصلی­ترین پاتوژن­های پرندگان، خسارات اقتصادی فراوانی را به صنعت مرغداری وارد می­کند. هدف اصلی این مطالعه شناسایی گونه <em>مایکوپلاسما سینوویه</em> در نمونه­های بالینی با استفاده از روش VlhA-PCRمی­باشد. برای بررسی تیتر سرمی، تعداد 375 نمونه سرمی از 25 گله مادر گوشتی اخذ و بر روی آن تست (Rapid Serum Agglutination) RSA انجام گردید که 143 نمونه، معادل 19 گله در آزمایش RSA مثبت گردید. جهت نمونه‌برداری برای (Polymerase Chain Reaction) PCR از 25گله­ای که 19 گله آن در تست RSA مثبت شده بودند، 20 گله انتخاب و سوآپ­های استریل از شکاف کامی، نای، کیسه هوایی و ریه از آنها تهیه گردید. سه سوآپ از سه پرنده داخل یک لوله آزمایش حاوی یک میلی­لیتر PBS انداخته شد و به آزمایشگاه منتقل گردید تا برای انجام PCR مورد استفاده قرار گیرد. در این مطالعه، از پرایمرهای اختصاصی برای ژن VlhA استفاده شد. محصول PCR تولیدی توسط پرایمرهای اختصاصی، در 8 گله، باند 400-350 جفت بازی را برای همه سویه­های فیلدی بر روی ژل الکتروفورز تشکیل داد. VlhA-PCR با حساسیت بسیار بالا می­تواند در تشخیص قطعی عفونت با <em>مایکوپلاسما سینوویه</em> در آزمایشگاه به کار برده شود.