پایش مولکولی کلنی موش‌های آزمایشگاهی نژادNIH موسسه رازی از نظر آلودگی به باکتری لپتوسپیرا اینتروگنس

Abstract

باکتری لپتوسپیرا اینتروگنس(Leptospira interrogans)، عامل بیماری لپتوسپیروز است که یکی از بیماری‌های مهم مشترک میان انسان و حیوانات می‌باشد. یکی از مهم‌ترین توصیه‌های انجمن بین‌المللی در رابطه با حیوانات آزمایشگاهی، استفاده از حیوانات با فلور میکروبی مشخص می‌باشد. بر این اساس، توصیه فدراسیون انجمن‌های علوم حیوانات آزمایشگاهی اروپا (FELASA)، پایش‌های تشخیصی جهت بررسی وضعیت آلودگی حیوانات به عوامل میکروبی مختلف الزامی می‌باشد. در این تحقیق میزان شیوع این باکتری در کلنی موش‌های آزمایشگاهی نژاد NIH مرکز پرورش حیوانات آزمایشگاهی موسسه رازی در سال 1396 مورد بررسی قرار گرفت. 74 سر موش پرورشی بالغ (در محدوده وزنی 35-30 گرمی و سن 8-6 هفته) بصورت تصادفی از هر دو جنس نر و ماده از کلنی پرورشی و 6 سر موش وحشی نیز بوسیله تله‌های زنده گیری از بیرون از ساختمان‌های پرورشی صید و بعد از کشتن به روش انسانی و کالبدگشایی، نمونه‌برداری از بافت کلیه آنها صورت گرفت و پس از آماده‌سازی، روش PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی باکتری لپتوسپیرا اینتروگنس انجام گردید. جهت طراحی و تهیه نمونه کنترل مثبت، با استفاده از ترانسفورمیشن پلاسمید pGEM - T easy vector حاوی قطعه ژن بیماری‌زای LipL32 در E.coli جهت تکثیر ژن و سپس استخراج آن صورت گرفت. از نمونه‌های بررسی شده، هیچگونه مورد مثبتی مشاهده نگردید. بر طبق دستورالعمل FELASA می‌توان چنین نتیجه‌گیری نمود که با اطمینان 9/99%، آلودگی به لپتوسپیرا اینتروگنس در کلنی موش‌های نژاد NIHموسسه رازی منتفی می‌باشد.