راه‌اندازی آزمون ممانعت از نورآمینیداز جهت تعیین تحت تیپ نورآمینیداز ویروس های آنفلوانزای پرندگان در موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی

Abstract

هنگام شناسایی ویروس‌های آنفلوانزای تیپ A علاوه بر تعیین تحت تیپ هماگلوتینین ویروس که به وسیله روش‌های سرولوژی و مولکولی روتین امکان‌پذیر است، نیاز به شناسایی تحت تیپ نورآمینیداز (NA) خصوصاً در رخدادهای ویروس‌های H5 و H7 (آنفلوانزای فوق حاد یا کم حدت) نیز هست. این امر غالبا به وسیله روش‌های مولکولی صورت می‌گیرد. از سال 1971 سازمان جهانی بهداشت (WHO) پیشنهاد کرد که آنتی‌ژن‌های نورآمینیداز ویروس‌های آنفلوانزای A بر اساس آزمون ممانعت از نورآمینیداز به تحت تیپ‌های مختلفی تقسیم شوند. در آزمایشگاه‌های مرجع تخصصی مانند آزمایشگاه‌های مورد تایید سازمان جهانی بهداشت دام (OIE) تست ممانعت از نورآمینیداز برای شناسایی تحت تیپ نورآمینیداز ویروس‌های آنفلوانزای پرندگان انجام می‌شود. با توجه به اهمیت و ارزش این تست و لزوم کاربرد آن، در این مطالعه سعی شد تا تست ممانعت از نورآمینیداز کلاسیک برای شناسایی تحت تیپ NA در نمونه‌های سرمی و هم در نمونه‌های ویروسی طبق پروتکل OIE راه‌اندازی گردد. برای تایید نتایج تست، از روش واکنش زنجیره پلی مراز معکوس با کمک پرایمرهای اختصاصی تحت تیپ به صورت همزمان استفاده شد. بر اساس نتایج حاصله پروتکل راه‌اندازی شده توانایی شناسایی و تفکیک تحت تیپ‌های مختلف آنتی‌ژن یا آنتی‌سرم نورآمینیداز را دارد. تست ممانعت از نورآمینیداز تستی کاربردی است که در امور تشخیصی و تحقیقاتی و از جمله هنگام تفکیک پرنده‌های بیمار از واکسینه (DIVA) خصوصا در مناطقی که ویروس اندمیک شده و سیاست واکسیناسیون اجرا می‌شود و نیز در آزمایشگاه‌های مرجع از جمله موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی کاربرد دارد.