تهیه کشت سلولی اولیه ماهی

Abstract

ویروس‌ها از عوامل ایجادکننده خسارات هنگفت در پرورش آبزیان می‌باشند. انواع کشت‌‌های سلولی از جمله کشت‌های اولیه، روش‌های مناسبی برای تشخیص و جداسازی ویروس‌ها می‌باشند. از آنجاکه دسترسی به تیره‌های سلولی به ویژه در خصوص ماهیان براحتی سایر گونه‌ها نمی‌باشد و نیز برای تمام ماهیان هنوز تیره سلولی ایجاد نگردیده است، لذا در این تحقیق اقدام به تهیه و استاندارد نمودن کشت سلولی اولیه ماهی گردید. نمونه‌هایی از اندام‌های داخلی ماهی قرمز (Carassius auratus) شامل کلیه، کبد، عضلات و تخمدان و نیز از اندام‌های خارجی شامل باله‌ها، بافت همبند قسمت پوزه و آبشش‌ها، تهیه و بر طبق دستورالعمل‌های استاندارد آماده گردیدند. جهت تهیه کشت‌سلولی اولیه ماهی از روش‌های هضم آنزیمی کوتاه‌مدت، طولانی‌مدت، روش نشا‌کاری بافت‌های ریز‌شده و روش معمولی استفاده گردید. از محیط کشت EMEM غنی‌شده با سرم جنین‌گاو در درجه‌حرارت 25 درجه سانتی‌گراد استفاده گردید. سلول‌های بدست آمده از روش‌های مختلف، رشد مناسبی داشته و به سطح پوششی کامل رسیدند و از آن‌ها چندین پاساژ متوالی تهیه گردید. بهترین نتیجه، از اندام‌های تخمدان و عضلات و روش هضم آنزیمی طولانی‌مدت با آنزیم تریپسین بدست آمد. با بکارگیری نتایج این تحقیق می‌توان در مواقع لزوم نسبت به تهیه کشت سلولی اولیه جهت جدا‌سازی ویروس‌ها و تشخیص بیماری‌های ویروسی ماهیان در کشور اقدام نمود.