بررسی میزان فعالیت آنزیم های GOT, GPT ,LDHپلاسمای منی و ارتباط آن باکیفیت اسپرماتوزوئیدهای منجمد گاومیش

Abstract

هدف این تحقیق تعیین میزان فعالیت آنزیم های GOT. GPTو نیز LDHپلاسمای منی در طی فرایند عمل آوری و انجماد و ارتباط آن با کیفیت<br />اسپرماتوزوئیدهای منجمد می باشد. برای این منظور تعداد 25انزال 5راس ازگاومیش های نر موجود در ایستگاه پرورش گاومیش شمالغرب کشور<br />(ایستگاه جبل) جمع آوری گردید. نمونه های منی با کیفیت عالی و با داشتن بیش از 80درصد اسپرماتوزوئید با تحرک رو به جلو در دمای 37درجه<br />سانتیگراد با رقیق کننده تریس رقیق گردید. پس از طی مرحله خنک شدن ( )coolingدر دمای 4درجه سانتیگراددر ظرف مدت 2ساعت و نیز اعمال<br />زمان تعادل 4-6ساعت در دمای 4درجه سانتیگراد متعاقب افزودن گلیسرول، نمونه های رقیق شده در پایوت های 0.5میلی لیتری فرانسوی با اعمال<br />زمان انجماد مشخص قبل از ورود در ازت مایع منجمد گردیده و در داخل کانتینرهای مخصوص ازت مایع نگهداری شدند. میزان فعالیت آنزیم های<br />مورد نظربلافاصله پس از جمع آوری منی ونیز در مورد نمونه پایوتهای منجمد پس از گذشت 72ساعت از زمان انجماد،متعاقب یخ گشایی ()thawing<br />در دمای 37درجه سانتیگراد به مدت 40ثانیه صورت گرفت. برای اندازه گیری فعالیت آنزیم LDHاز روش کنتیک اکسیداسیون لاکتات به پیرووات و<br />نیز برای اندازه گیری فعالیت سایر آنزیم ها از روش کالریمتری استفاده گردید. در این راستا میزان تحرک، درصد اسپرماتوزوئیدهای با غشای پلاسمالمای<br />سالم و یکپارچه و نیز آکروزومهای دست نخورده نمونههای منجمد مورد نظر پس از ذوب به ترتیب یا استفاده از میکروسکوپ صفحه گرم ( 37درجه<br />سانتیگراد،) آزمایش HOSTو نیز رنگ آمیزی گیمسا مورد بررسی قرار گرفت میانگین فعالیت آنزیم های LDH. GPT. GOTپایوتهای منجمد گاومیش<br />نر مورد بررسی به ترتیب ( 90/4±32/7 )IU/L( ،270/4±58/5 )IU/L( ،140/4±18/5 )IU/Lگزارش گردید. آنالیز نتایج بدست آمده در ارتباط با ارزیابی<br />کیفیت نمونه های منی منجمد پس از یخ گشایی بر اساس میزان فعالیت آنزیم های LDH. GPT. GOTنشان داد که بین میزان تحرک ونیز درصد<br />اسپرماتوزوئیدهای زنده و با آکروزوم نرمال با میزان فعالیت آنزیم های مورد نظر ارتباط معکوس و معنی داری وجود دارد، بطوریکه با کاهش کیفیت منی<br />منجمد میزان فعالیت آنزیم های تحت آزمایش افزایش نشان می دهد ( .)P>0/05به طور کلی نتایج حاصل از این تحقیق نشان می دهد اندازه گیری میزان<br />فعالیت آنزیم های پلاسمای منی میتواند به عنوان یک شاخص در ارزیابی کیفیت نمونه منی منجمد گاومیش مورد استفاده قرار گیرد