بررسی برخی خصوصیات ژنی جدایه‌های بومی باکتری Bacillus thuringiensis از خاک‌های مناطق جنگلی استان گلستان

Abstract

جدایه­های بومی باکتری <em>Bacillus thuringiensis</em> (Bt) از خاک­های مناطق جنگلی شهرستان­های مختلف استان گلستان جدا­سازی و ژن <em>Cry</em> و <em>Vip</em> عامل تولید توکسین و پروتئین مؤثر روی حشرات در آن­ها ردیابی شد. از کل 42 نمونه خاک مورد بررسی از طریق بازدارندگی انتخابی استات سدیم، تعداد 160 جدایه Bt جدا­سازی گردید. پس از کشت کلنی­ها، رنگ­آمیزی اختصاصی و شناسایی میکروسکوپی در 40 درصد از جدایه­ها انجام شد، پروتئین کریستالی کشنده برای بسیاری از حشرات مشاهده گردید. بررسی مولکولی جدایه­های Bt نشان داد که در 12 جدایه ژن­های<em>Cry</em> و <em>Vip</em> وجود داشتند. آزمایشات تعیین ساختار ژنی برای وجود سه ژن <em>Cry</em> <em>1A</em> (شامل <em>Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac</em>) و ژن­های <em>Cry1I</em>، <em>Cry1F</em>، <em>Cry2</em>، <em>Cry9</em> و <em>Vip3Aa</em> با استفاده از 8 جفت آغاز­گر اختصاصی انجام شد. ژن­های <em>Cry1Ab</em>، <em>Cry</em>2 و <em>Cry1F</em> در همه جدایه­ها مشاهده شد، ولی ژن­های <em>Cry1Aa</em>، <em>Cry1I</em> و <em>Cry1Ac</em> فراوانی بسیار کم (کم­تر از 20 درصد) داشتند و یا در هیچ یک از جدایه­ها یافت نشدند. نتایج این تحقیق می­تواند برای ردیابی جدایه­های بومی باکتری Bt که دارای پروتئین­های کریستالی مؤثر روی حشرات هستند، مفید واقع شود.