شناسایی باکتری‌های خاکزی باغ‌های انگور استان قزوین و بررسی اثر بازدارندگی آنها بر Rhizobium vitis، عامل گال ریشه و طوقه انگور

Abstract

گال طوقه و ریشه ناشی از باکتری <em>Rhizobium vitis </em>از مهمترین بیماری‌های انگور در سراسر جهان به‌شمار می‌آید. از آنجایی­که تاکنون کنترل شیمیایی موثری برای این بیماری ارائه نشده است، کنترل آن با برخی باکتری‌های آنتاگونیست مورد توجه قرار گرفته است. این پژوهش با هدف شناسایی باکتری‌های خاکزی باغ‌های انگور استان قزوین و بررسی اثر آنتاگونیستی آنها بر <em>Rh. vitis </em>انجام شد. از نمونه‌های جمع‌آوری شده از خاک و ریشه و طوقه انگور در 22 منطقه استان، 210 جدایه به‌دست آمد و پس از گروه بندی، 73 جدایه برای بررسی بیشتر انتخاب شدند. شناسایی جدایه‌ها با آزمون‌های فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی انجام شد. به‌علاوه، از آغازگرهای Bsub5F/Bsub3R برای تایید شناسایی جدایه‌های مشکوک به <em>Bacillus subtilis</em> استفاده شد. توانایی جدایه‌ها در تولید آنتی‌بیوتیک، سیدروفور، سیانید هیدروژن و آنزیم پروتئاز بررسی گردید و جهت شناسایی جدایه‌های سودوموناس‌فلئورسنت دارای ژن‌های <em>PhI</em>D و <em>hcn</em>ABC، به‌ترتیب از آغازگر‌هایPhI2a /PhI2b وPM2 /PM7-26R استفاده شد. اثر آنتاگونیستی پنج جدایه، انتخاب شده از بین باکتری‌های مختلف شناسایی شده، بر باکتری عامل بیماری روی قطعات شلغم و هویج بررسی گردید. بر اساس نتایج، جدایه‌های آنتاگونیست به بیوارهای I، III و IV از <em>Pseudomonas</em> <em>fluorescens</em> و <em>B. subtilis</em> تعلق داشتند. همه جدایه‌های مذکور با تولید آنتی‌بیوتیک از رشد<em>Rh. vitis </em>جلوگیری کردند. به‌علاوه، بیوارهای I، III و IV از <em>P.</em> <em>fluorescens</em> قادر به تولید پروتئاز و سیانید هیدروژن بودند اما در تولید سیدروفور، نتایج متفاوتی را نشان دادند. آغازگرهای اختصاصی وجود ژن‌های <em>PhI</em>D و <em>hcn</em>ABC را در بعضی از جدایه‌های بیووارهای I و IV از <em>P.</em> <em>fluorescens</em> به اثبات رساندند. دو جدایه از بیووار I و یک جدایه از بیووار IV از <em>P.</em> <em>fluorescens</em> و نیز دو جدایه از <em>B. subtilis </em>به‌طور کامل از تشکیل گالتوسط<em>Rh. vitis </em>روی قطعات شلغم و هویج جلوگیری کردند.