شناسایی اولین جدایه‌های باسیل پاراتوبرکلوزیس در بز و گوسفند از ناحیه مرکزی ایران

Abstract

در این بررسی، بر روی نمونه‌های مدفوع دام‌های مشکوک به بیماری پاراتوبرکلوزیز و نیز تعدادی از دام‌های سالم منطقه سمیرم، بر اساس پروتکلهای مورد تایید OIE، عملیات کشت میکروبی در محیط هرولدز اگ با مایکوباکتین و نیز محیط هرولدز اگ بدون مایکوباکتین انجام گردید سپس کشتها در انکوباتور قرار داده شد و بطور هفتگی کنترل و ثبت اطلاعات انجام گردید. از کلنیهای رشد یافته، گسترش، رنگ آمیزی (ذیل–نلسون) و بررسی میکروسکوپیک بعمل آمد، سپس از نمونه‌های مثبت میکروسکوپی، کشت مجددساب کالچر شد و در نهایت آزمونهای مولکولار (PCR) بر روی نمونه‌های مثبت جهت تعیین شناسایی و هویت انجام شد. در طول انجام این بررسی تعداد 68 نمونه از بز و گوسفند منطقه سمیرم اخذ شد که90% آنها دارای نشانی‌های بالینی مشکوک به بیماری یون بودند. در نهایت از 11 نمونه باسیل اسید فست یون جدا شد که پس از کشت‌های مجدد و رسیدن به حجم مناسب باکتری، آزمون ملکولار زیر انجام گرفت. با استفاده از پرایمرهای IS900، مشخص شد که تمامی باسیل‌های رشد کرده متعلق به جنس مایکوباکتریوم اویوم تحت گونه پاراتوبرکولوزیس می‌باشند که پس از الکتروفورز محصول PCR بر روی ژل و مشاهده باندی به اندازه bp 400 مورد تایید تشخیص نهائی قرار گرفت.