تکثیر اووسیست‌های کریپتوسپوریدیوم بیله‌ای درتخم مرغ جنین‌دار عاری از پاتوژن‌های اختصاصی

Abstract

کریپتوسپوریدیوم بیله‌ای انگل تک یاخته ای و بیماری‌زای اختصاصی طیور است که قادر به رشد و تکثیر در سلول‌های پوششی دستگاه تنفسی، گوارشی و ادراری ماکیان می‌باشد و از صنعت ماکیان ایران هم جدا شده است. هدف از این تحقیق بررسی توانایی تکثیر این انگل در تخم مرغ جنین دار SPF بود. اووسیست های انگل با کمک پاساژ در جوجه و با استفاده از دی کرومات پتاسیم 5/2 در صد تکثیر و نگهداری شده بودند. ابتدا مراحل مختلف خالص نمودن اووسیست های انگل، از جمله روش تعدیل یافته شناور سازی با محلول شکر اشباع شیتر و افزودن هیپوکلریت سدیم انجام گرفت. سپس اووسیست ها با کمک محلول PBS شسته شدند و آنتی بیوتیک های مناسب اضافه گردید. دو نمونه شامل اووسیست های کامل و باز نشده و اووسیست‌های انگل پس از مجاورت با مایع آزاد کننده اسپوروزوئیت، به طور جداگانه در حفره آلانتوئیک تخم مرغ های SPF جنین دار 10 روزه تلقیح شدند. سپس تخم مرغ ها در انکوباتور 37 درجه سانتی گراد به مدت 7 روز نگهداری و هر روز نور بینی گردید. نتایج نشان داد که هر دو نوع نمونه تلقیح شده منجر به رشد وتکثیر مراحل مختلف انگل در پرده کوریو آلانتوئیک و رها شدن اووسیست‌ها در مایع آلانتوئیک شده است. در تلقیح 05 x 1 اووسیست، 106 x 1 اووسیست از مایع آلانتوئیک یک تخم مرغ حاصل شد. با توجه به تکثیر مناسب کریپتوسپوریدیوم بیله ای در تخم مرغ های جنین دار، بنظر می رسد که در کارهای تحقیقاتی و در موارد نیاز به تکثیر محدود انگل، به خوبی می توان از تلقیح مستقیم اووسیست های دست نخورده انگل به تخم مرغ جنین دار SPF یا احتمالاً تخم جنین‌دار سایر پرندگان هم استفاده نمود.