مهار تولید ROS از طریق افزودن آنتی اکسیدان های هدفمند میتوکیو و تاثیر آنها بر عملکرد اسپرم‌های منجمد-یخ گشایی شده خروس

Abstract

یکی از دلایل اصلی کاهش زنده‌مانی اسپرم منجمد، تولید گونه‌های فعال اکسیژن می‌باشد (ROS). از آنجائیکه انتخاب آنتی‌اکسیدان‌ها برای مهار تولید ROS به دلیل عدم توانایی آنها در نفوذ به محل اصلی تولید ROS (میتوکندری) تاکنون کارایی خوبی در برنامه‌های انجماد اسپرم نداشته است؛ لذا، به این منظور ما روش جدیدی را برای مهار تولید Ros در فرایند انجماد اسپرم خروس بررسی کردیم. در این مطالعه 14 خروس )سویه تجاری راس( با 28 هفته سن استفاده گردید. نمونه‌های منی پس از ارزیابی اولیه با یکدیگر مخلوط شده (Pooling) و پس از رقیق‌سازی و افزودن ماده MitoQ در پنج سطح (صفر، 05/0، 1/0، 2/0 و 4/0 نانومولار) منجمد گردیدند. پس از یخ‌گشایی، شاخص‌های درصد زنده‌مانی ، پارامترهای تحرک اسپرم ، یکپارچگی‌غشای اسپرم ، میزان لیپید پراکسیداسیون و مورفولوژی اسپرم مورد ارزیابی قرار گرفتند. تجزیه و تحلیل داده‌ها بوسیله رویه GLM با استفاده از نرم افزار SAS(3/9) در قالب طرح کاملا تصادفی با پنج تیمار و پنج تکرار انجام گرفت. برای مقایسه میانگین تیمارها از آزمون توکی استفاده شد. نتایج حاصل از مطالعه حاضر نشان داد که افزودن MitoQ به محیط انجماد اسپرم خروس باعث کاهش قابل توجه لیپیدپراکسیداسیون و افزایش میزان زنده‌مانی، یکپارچگی غشای پلاسمایی و مورفولوژی اسپرم شد. نتایج حاصل نشان داد که افزودن MitoQ در سطح 1/0 نانومولار سبب بهبود تحرک کل و پیش‌رونده، زنده‌مانی، یکپارچگی غشای پلاسمایی اسپرم ها نسبت به گروه شاهد گردید؛ همچنین موجب کاهش معنی‌دارغلظت MDA نسبت به گروه شاهد شد (05/0p<).