بررسی بیان موقت ژن VP2 ویروس بسیار حاد بیماری بورس عفونی در برگ توتون، یونجه و کاهو به روش آگرواینفیلتراسیون

Abstract

پروتئین VP2 ایمونوژن اصلی محافظت‌کننده جوجه‌ها در برابر ویروس بیماری بورس عفونی است و با توجه به اهمیت و مقبولیت فناوری جدید تولید پروتئین‌های نوترکیب شامل واکسن‌ها، پادتن‌ها و داروها درگیاهان، تولید پروتئین نوترکیب VP2 بسیار مورد توجه قرار دارد. در این تحقیق از بیان موقت ژن VP2 به روش آگرواینفیلتراسیون یا انتقال ژن تحت خلاء توسط آگروباکتریوم، برای تولید این پروتئین نوترکیب درگیاهان توتون، یونجه وکاهو استفاده شده است. بدین منظورآگروباکتریوم حاوی پلاسمید pBI121 حاوی ژن VP2 به طول 1356 جفت باز تحت پروموتر CaMV35S به بافت برگ‌های تازه این گیاهان منتقل گردید. بیان موقت پروتئین در برگ‌های تراریخت، با استفاده از پلیت الایزا و لکه‌گذاری پروتئین اندازه‌گیری شد. با استفاده از روش آگرواینفیلتراسیون و انتقال سازه بیانی VP2، بیشترین بیان این پروتئین به ترتیب در برگ‌های ترآریخت یونجه و توتون و کمترین بیان در برگ‌های ترآریخت کاهو بدست آمد.