بیان پروتئین نورآمینیداز نوترکیب ویروس آنفلوانزا سویه واکسینال H1N1 در سیستم بیانی Baculovirus

Abstract

دو آنتی ژن ساختاری هماگلوتینین (HA)و نورآمینیداز (NA)، برای توسعه یک واکسن بر پایه مهندسی ژنتیک در برابر ویروس آنفلوانزا مورد نظر محققین و تولیدکنندگان واکسن مذکور میباشند. واکسن‌های نوترکیب با استفاده از روش ساده و موثر تولید می‌شوند و بایستی توسط یک آنتی‌ژن خاص موجب القای پاسخ ایمنی شوند به نحوی که دارای اثربخشی بیشتری نسبت به واکسن‌های دارای ویروس کامل باشند. در مطالعه حاضر، ژن نورآمینیداز سویه واکسنی H1N1 که نسبت به ژن هامگلوتینین با ثبات تر بوده و دارای موتاسیون‌های کمتری می‌باشد توسط واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) تکثیر شد و سپس در حامل بیانی یوکاریوتی HTA pFastBac قرار گرفت. بیان پروتئین نورآمینیداز بوسیله آزمایش PAGE-SDS و وسترن بلات با استفاده از آنتی‌بادی پلی کلونال تجاری علیه نورآمینیداز مورد بررسی قرار گرفت. علاوه براین، از روش ایمونوفلورسانس کیفی به منظور ارزیابی آنتی‌ژن و فعالیت بیولوژیکی پروتئین نوترکیب نورآمینیداز در سطح سلول حشره (Sf9) آلوده شده به باکولوویروس حامل ژن نورآمینیداز با استفاده از آنتی‌سرم خرگوش واکسینه استفاده گردید. در نهایت با توجه به کلون تاییدشده ژن نورآمینیداز میتوان ادعا نمود که برای ساخت واکسن نوترکیب آنفلوانزای انسانی قدم مهم و اساسی برداشته شده است.