شناسائی سویه Toxoplasma gondii در انسان و موش در شهرستان ارومیه به روشPCR-RFLP

Abstract

T.gondii یک کوکسیدیای روده ای است و آلودگی به آن در انسان و حیوانات خونگرم در سراسر دنیا وجود دارد.این تک یاخته می تواند سبب واگیری شدید و تلفات در جنین در حال رشد، موارد نقص سیستم ایمنی مانند مبتلایان به ایدز و افرادی مبتلا به سرطان که تحت شیمی درمانی قرار دارند، شود. هم چنین موجب سقط جنین در گوسفند و بز و ایجاد خسارات اقتصادی مهم می گردد. در این بررسی از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز(PCR)به منظور تشخیص آلودگی به T.gondii با استفاده از ژن 1 B استفاده گردید.این ژن در هر سه سویه توکسوپلاسما که تا به حال مشخص شده اند، وجود دارد.نمونه های خون در این بررسی از 26 نفر از افراد مشکوک به توکسو پلاسما از آزمایشگاه های انسانی و نمونه های بافت از قلب و مغز 54 قطعه موش خانگی در شهرستان ارومیه اخذ گردید. در این بررسی برای استخراج DNA از روش Fuentes و همکاران1996 برای نمونه های خون انسان و از روش Sambrook و همکاران 1989 برای نمونه های بافت مغز و قلب موش استفاده شد.بعد از ردیابی محصولات PCR مشخص گردید که 19 نمونه آلوده به توکسوپلاسما گوندئی در بین نمونه های اخذ شده وجود دارد (7 نمونه انسان و 12 نمونه موش).نمونه های مثبت تحت هضم آنزیمی با آنزیم محدودکننده AluI قرار گرفتند که الگوی برش بعد از هضم آنزیمی محصول PCR کاملاً مشابه بود که مربوط به تیپT.gondiiIمی باشد. این نتایج نشان می دهد که سویه مشابه از T.gondii می توانند باعث آلودگی در انسان و موش گردد.