بررسی اثر داروهای اگزالی‌پلاتین و پاکلی تاکسل برسلول‌های سرطان کولون (HT29) و آنالیز بیان ژن‌های آپوپتوزی کاسپاز3، کاسپاز9 وP53

Abstract

هدف: هدف بررسی اثرات سمیت سلولی پاکلی‌تاکسل و اگزالی‌پلاتین بر رده سلولی سرطان کولون (HT29) و آنالیز بیان ژن‌های آپوپتوزی کاسپاز 3، 9و P53 می‌باشد. مواد و روش ها: ابتدا سمیت سلولی داروهای پاکلی‌تاکسل و اگزالی پلاتین و اثر توام آنها با غلظت‌های مختلف بر رده سلولی HT29 با روش MTT بررسی شد و غلظت 50 درصد کشندگی (IC50) آن تعیین شد. میزان بیان ژن‫های آپوپتوزی کاسپاز 3 و 9 نسبت به ژن مرجع GAPDH با استفاده از روش Real-Time PCR بررسی شد. هم چنین بررسی آپوپتوز سلول ها با استفاده از رنگ آمیزی Annexin V/PI و DAPI انجام شد. ‬‬‬نتایج :پاکلی‌تاکسل و اگزالی‌پلاتین به ترتیب در غلظت های 25/3 و 00062/0 میکروگرم در میلی‫لیتر بیشترین اثر سمیت سلولی را دارد و میزان IC50 آن 00016/0 و µg/ml 5/12 محاسبه شد. تیمار همزمان داروها زنده‌مانی سلول‌ها را کاهش داد . بیان ژن‫های کاسپاز 3 و 9, P53 نسبت به ژن مرجع GAPDH در سلول های سرطان کولون تیمار شده نیز افزایش یافت. نتایج آزمون DAPI نشان دهنده ی قطعه قطعه شدن هسته‌ها و آپوپتوز در گروههای تیماری همزمان بود.‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬ بررسی آپوپتوز با استفاده از Annexin V/PI نشان می‌دهد که 98 درصد سلول‌های گروه شاهد سالم می باشند و درصد زیادی از سلول‌ها تحت تیمار دچار آپوپتوز شده اند . ‬‬‬‬‬نتیجه گیری: با‌ توجه به سمیت سلولی و القای فرایند آپوپتوزیس در رده سلولی سرطان کولون توسط داروهای پاکلی‌تاکسل و اگزالی-پلاتین، می‫توان نتیجه‌گیری کرد که این داروها گزینه مناسب جهت درمان سرطان کولون می باشند.‬‬‬‬‬