| dc.contributor.author | مشیری, زهرا | fa_IR |
| dc.contributor.author | حداد, رحیم | fa_IR |
| dc.contributor.author | هنری, حسین | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 1399-10-02T15:30:13Z | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 2020-12-22T15:30:14Z | |
| dc.date.available | 1399-10-02T15:30:13Z | fa_IR |
| dc.date.available | 2020-12-22T15:30:14Z | |
| dc.date.issued | 2020-12-01 | en_US |
| dc.date.issued | 1399-09-11 | fa_IR |
| dc.identifier.citation | مشیری, زهرا, حداد, رحیم, هنری, حسین. (1399). طراحی بیوانفورماتیکی و ساخت کاست ژنی دربردارندهی ژنهای blf1، ctxB و stxB. مجله دانشکده علوم پزشکی نیشابور, 8(4), 73-87. | fa_IR |
| dc.identifier.issn | 2383-3203 | |
| dc.identifier.issn | 2476-2768 | |
| dc.identifier.uri | http://journal.nums.ac.ir/article-1-797-fa.html | |
| dc.identifier.uri | https://iranjournals.nlai.ir/handle/123456789/700674 | |
| dc.description.abstract | مقدمه
باکتری بورخولدریا سودومالئی، ویبریوکلرا و شیگلا دیسانتری عامل بیماری میلوئیدوزیس، وبا و شیگلوز در انسان میباشند. پروتئینهای BLF1 مربوط به B. pseudomallei، CTxB ویبریوکلرا و StxB شیگلا دیسانتری خاصیت آنتیژنیک، ادجوانتی مخاطی، حاملی و ایمنی‌زایی دارند. هدف این مطالعه، ساخت کاست ژنی دربردارندهی ژنهای blf1، ctxB وstxB و بیان پروتئین آنها در E. coli میباشد.
مواد و روشها
با استفاده از نرمافزارهای بیوانفورماتیک Protparam و Modeller، حالتهای مختلف پروتئین کایمریک ژنهای مربوطه بررسی شد. ساختار دوم پروتئین و اپیتوپهای خطی و ساختاری نیز تعیین گردید. ژنهای blf1 و stxB از پلاسمید pET28a-BLF1-STxB، PCR و قطعه 850 جفت بازی BLF1-STxB با جایگاههای آنزیمی NotI وSalI در وکتور بیانی pET28a-CTxB زیرهمسانهسازی و به باکتری E. coli سویهی BL21(DE3) ترانسفورم شد. پس از توالی‌یابی، بهینه‌سازی بیان ژن سنتزی تحت القایIPTG (Isopropyl-β-D-thiogalactoside) و درجه حرارت 25 درجه سانتیگراد انجام و بوسیله تکنیک SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافتهها
شاخص ناپایداری پروتئین کایمر برابر با 06/40 و نیمهعمر آن در E. coli بیش از 10 ساعت به دست آمد. شاخص سازگاری کدون سازهی کایمر به 9/0 و محتوای GC آن به 9/54 درصد افزایش یافت. بهترین ترتیب ممکن برای ساخت واکسن نوترکیب، ممزوج سهتایی CTxB-BLF1-STxB بدست آمد. بیان پروتئین نوترکیب از ژن سنتزی تحت القای IPTG، منجر به تولید پروتئینی با وزن مولکولی 48 کیلودالتون شد.
نتیجهگیری
با توجه به توانایی توقف پروتئینسازی BLF1، خاصیت حاملی STxB و خاصیت ادجوانتی CTxB، قرار دادن این سه ژن در یک کاست ژنی به بهترین حالت، میتواند به عنوان یک کاندید واکسن مناسب مورد توجه قرار گیرد. | fa_IR |
| dc.format.extent | 737 | |
| dc.format.mimetype | application/pdf | |
| dc.language | فارسی | |
| dc.language.iso | fa_IR | |
| dc.publisher | دانشکده علوم پزشکی نیشابور | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | مجله دانشکده علوم پزشکی نیشابور | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | Journal Of Neyshabur University Of Medical Sciences | en_US |
| dc.subject | بورخولدریاسدومالئی | fa_IR |
| dc.subject | سم بی ال اف 1 | fa_IR |
| dc.subject | میلوئیدوزیس | fa_IR |
| dc.subject | وبا | fa_IR |
| dc.subject | شیگلوز | fa_IR |
| dc.subject | انفورماتیک پزشکی | fa_IR |
| dc.title | طراحی بیوانفورماتیکی و ساخت کاست ژنی دربردارندهی ژنهای blf1، ctxB و stxB | fa_IR |
| dc.type | Text | en_US |
| dc.type | پژوهشي اصیل | fa_IR |
| dc.contributor.department | دانشگاه بین المللی امام خمینی (ره) قزوین | fa_IR |
| dc.contributor.department | دانشگاه بین المللی امام خمینی (ره) قزوین | fa_IR |
| dc.contributor.department | ، مرکز علم و فناوری زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران | fa_IR |
| dc.citation.volume | 8 | |
| dc.citation.issue | 4 | |
| dc.citation.spage | 73 | |
| dc.citation.epage | 87 | |
