| dc.contributor.author | هاشم زهی, رسول | fa_IR |
| dc.contributor.author | دوستی, عباس | fa_IR |
| dc.contributor.author | کارگر, محمد | fa_IR |
| dc.contributor.author | جعفری نیا, مجتبی | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 1399-08-23T22:41:30Z | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 2020-11-13T22:41:30Z | |
| dc.date.available | 1399-08-23T22:41:30Z | fa_IR |
| dc.date.available | 2020-11-13T22:41:30Z | |
| dc.date.issued | 2017-10-01 | en_US |
| dc.date.issued | 1396-07-09 | fa_IR |
| dc.identifier.citation | هاشم زهی, رسول, دوستی, عباس, کارگر, محمد, جعفری نیا, مجتبی. (1396). کلون سازی و بررسی بیان ژن nlpD اسینتوباکتر بومانی در سلول های HDF انسان به روش RT-PCR. دوماه نامه علمي ـ پژوهشي فيض, 21(4), 359-366. | fa_IR |
| dc.identifier.issn | 1029-7855 | |
| dc.identifier.issn | 2008-9821 | |
| dc.identifier.uri | http://feyz.kaums.ac.ir/article-1-3308-fa.html | |
| dc.identifier.uri | https://iranjournals.nlai.ir/handle/123456789/645786 | |
| dc.description.abstract | سابقه و هدف: اسینتوباکتر بومانی یکی از باکتری های بسیار مقاوم در برابر انواع آنتی بیوتیک ها در جهان است. این باکتری عامل عفونت های بیمارستانی به صورت بومی یا همه گیر بوده و هنوز واکسن موثری علیه آن وجود ندارد. NlpD یکی از عوامل آنتی ژنی مهم است که سبب تحریک سیستم ایمنی میزبان می گردد. بنابراین، هدف از این تحقیق، کلونسازی و بررسی بیان ژن nlpD باکتری اسینتوباکتر بومانی در سلول های HDF (Human dermal fibroblast) است.
مواد و روش ها: در این تحقیق تجربی ژن nlpD از روی ژنوم اسینتوباکتر بومانی با استفاده از روش PCR تکثیر شد. سپس، ژن مذکور به ترتیب در ناقل های pTZ57R/T و pIRES2-EGFP کلونسازی و سابکلون گردید. تایید صحت کلون سازی ژن با سه روش PCR، آنزیم های برش دهنده و تعیین توالی مورد ارزیابی قرار گرفت. سپس، ناقل نوترکیب نهایی pIRES2-EGFP-nlpD با کمک الکتروپوریشن به سلول های HDF منتقل گردید و بیان ژن هدف در این سلول ها با روش RT-PCR بررسی شد.
نتایج: قطعه 831 جفت بازی مربوط به ژن nlpD اسینتوباکتر بومانی با موفقیت تکثیر شد. هم چنین، نتایج تحقیق نشان داد که سازواره نهایی pIRES2-EGFP-nlpD تشکیل گریده است. مشاهده باند 831 جفت بازی پس از انجام RT-PCR، در سلول های ترانسفورم شده نسبت به سلول های شاهد، موید بیان ژن nlpD در سلول هایHDF می باشد.
نتیجه گیری: سازواره نهایی ساخته شده در این تحقیق توان بیان ژن nlpD اسینتوباکتر بومانی را در سلول های یوکاریوتی دارد. بیان موفق ژن هدف می تواند در راستای بررسی ایمنی زایی در حیوانات آزمایشگاهی به عنوان یک واکسن نوترکیب مدنظر قرار گیرد. هم چنین، سازواره pIRES2-EGFP-nlpD از پتانسیل لازم برای بررسی به عنوان واکسن ژنی در تحقیقات آینده برخوردار است. | fa_IR |
| dc.format.extent | 299 | |
| dc.format.mimetype | application/pdf | |
| dc.language | فارسی | |
| dc.language.iso | fa_IR | |
| dc.publisher | دانشگاه علوم پزشکی کاشان | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | دوماه نامه علمي ـ پژوهشي فيض | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | Feyz Journal of Kashan University of Medical Sciences | en_US |
| dc.subject | اسینتوباکتر بومانی | fa_IR |
| dc.subject | nlpD | fa_IR |
| dc.subject | بیان ژن | fa_IR |
| dc.subject | RT-PCR | fa_IR |
| dc.subject | عمومى | fa_IR |
| dc.title | کلون سازی و بررسی بیان ژن nlpD اسینتوباکتر بومانی در سلول های HDF انسان به روش RT-PCR | fa_IR |
| dc.type | Text | en_US |
| dc.type | پژوهشي | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه ژنتیک مولکولی، واحد علوم و تحقیقات فارس، دانشگاه آزاد اسلامی، شیراز | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه ژنتیک مولکولی، واحد مرودشت، دانشگاه آزاد اسلامی، مرودشت | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه میکروبیولوژی، واحد جهرم، دانشگاه آزاد اسلامی، جهرم | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه ژنتیک مولکولی، واحد مرودشت، دانشگاه آزاد اسلامی، مرودشت | fa_IR |
| dc.citation.volume | 21 | |
| dc.citation.issue | 4 | |
| dc.citation.spage | 359 | |
| dc.citation.epage | 366 | |