| dc.contributor.author | صادقی, مرتضی | fa_IR |
| dc.contributor.author | حجتی, زهره | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 1399-08-23T22:36:54Z | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 2020-11-13T22:36:55Z | |
| dc.date.available | 1399-08-23T22:36:54Z | fa_IR |
| dc.date.available | 2020-11-13T22:36:55Z | |
| dc.date.issued | 2016-11-01 | en_US |
| dc.date.issued | 1395-08-11 | fa_IR |
| dc.identifier.citation | صادقی, مرتضی, حجتی, زهره. (1395). طراحی، ترانسفورماسیون و تکثیر ایزوفرم نوترکیبVEGF111b در E. coli Top10 برای تولید داروی نوترکیب. دوماه نامه علمي ـ پژوهشي فيض, 20(5), 447-453. | fa_IR |
| dc.identifier.issn | 1029-7855 | |
| dc.identifier.issn | 2008-9821 | |
| dc.identifier.uri | http://feyz.kaums.ac.ir/article-1-3179-fa.html | |
| dc.identifier.uri | https://iranjournals.nlai.ir/handle/123456789/645387 | |
| dc.description.abstract | سابقه و هدف: سنتز پروتئین های نوترکیب با خاصیت مهار گیرنده های رشد در تومورهای سرطانی یکی از راه های جدید درمان سرطان است. هدف مطالعه حاضر طراحی و کلون ایزوفرم نوترکیبVEGF111b در وکتور pBudCE4.1 و بررسی سازگاری این سازه با باکتری E. coli Top10 جهت تولید داروی نوترکیب است.
مواد و روش ها: ایزوفرم جدید VEGF111b با استفاده از توالیهای موجود در بانکهای ژنی و نرمافزار 7 oligoطراحی شده و توسط آنزیمهای BGLII و KpnI بریده شده و در پایین دست پروموتور EF-1 در وکتور pBudCE4.1 کلون شد. وکتور نوترکیب pBud.VEGF111b توسط روش کلرید کلسیم در باکتری E. coli Top10 ترانسفورم شد. جداسازی باکتری های نوترکیب در محیط LBA حاوی غلظت 3/0 و 5/0 درصد آنتیبیوتیک زئوسین انجام شد. در مرحله آخر وکتور نوترکیب با استفاده از کیت استخراج DNA از ژل (Thermo K0513) استخراج شده و وجود قطعه نوترکیب VEGF111b توسط هضم آنزیمی و تعیین توالی تائید شد.
نتایج: الحاق قطعه 111b در جایگاه مورد نظر تائید شد. تمامی کلونی های E. coli Top10 مشاهده شده در محیط حاوی غلظت 0/5 درصد زئوسین حاوی قطعه نوترکیب VEGF111b بودند و در غلظت 0/3 درصد زئوسین، 61/9 درصد کلونی نوترکیب مشاهده شد. وجود توالیVEGF111b در باکتری های نوترکیب توسط هضم آنزیمی و تعیین توالی تائید شد.
نتیجه گیری: مطالعه حاضر گامی مهم در جهت تولید داروی نوترکیبVEGF111b و بررسی عملکرد ضد سرطانی این پروتئین است. وکتورpBudCE4.1 با دارا بودن 2 جایگاه کلونینگ و 8 جایگاه برش آنزیمی کاندید مناسبی برای کلونینگ و بیان پروتئین های نوترکیب در E. coli Top10 است. | fa_IR |
| dc.format.extent | 569 | |
| dc.format.mimetype | application/pdf | |
| dc.language | فارسی | |
| dc.language.iso | fa_IR | |
| dc.publisher | دانشگاه علوم پزشکی کاشان | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | دوماه نامه علمي ـ پژوهشي فيض | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | Feyz Journal of Kashan University of Medical Sciences | en_US |
| dc.subject | E. coli | fa_IR |
| dc.subject | پروتئین نوترکیب | fa_IR |
| dc.subject | VEGF111b | fa_IR |
| dc.subject | medicine | fa_IR |
| dc.subject | paraclinic | fa_IR |
| dc.title | طراحی، ترانسفورماسیون و تکثیر ایزوفرم نوترکیبVEGF111b در E. coli Top10 برای تولید داروی نوترکیب | fa_IR |
| dc.type | Text | en_US |
| dc.type | پژوهشي | fa_IR |
| dc.contributor.department | مرکز تحقیقات ژنتیک انسانی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه اصفهان | fa_IR |
| dc.citation.volume | 20 | |
| dc.citation.issue | 5 | |
| dc.citation.spage | 447 | |
| dc.citation.epage | 453 | |