جداسازی و شناسایی سیست Dunaliella salina (Chlorophyceae) از رسوبات ساحلی لیپار (دریای عمان) با استفاده از آنالیز مولکولی

Abstract

برخی از گونه­های فیتوپلانکتون ­در شرایط نامساعد و در چرخه زندگی تولیدمثلی خود سیست تولید کرده که در رسوبات کف ته­نشین می­شوند و تحت شرایط مساعد مجدداً شکوفا شده و به ستون آب برمی­گردند. بمنظور شناسایی دقیق مورفولوژی، گونه­های فیتوپلانکتون­ در دو مرحله­ی سیست و متحرک بررسی گردیدند زیرا برخی از سیست­های مشابه به فیتوپلانکتون­ متفاوتی تبدیل می­شوند. هدف از این تحقیق، کشت سیست­های موجود در رسوبات خلیج چابهار منطقه لیپار و شناسایی نمونه­های شکوفا شده می‌باشد. رسوبات از منطقه لیپار در سال 1394 توسط Ekman Grab با سطح جمع کنندگی 225 سانتی‌متر مربع جمع‌آوری گردید. سیست زنده گرد ناشناخته بصورت انفرادی از رسوبات جدا­سازی شد و در فایکولب در شرایط کاملاً استریل ب‌صورت جداگانه تحت شرایط 12 ساعت روشنایی و 12 ساعت تاریکی در درجه حرارت °C1±25 در محیط کشت F2، کشت داده شدند. بررسی مورفولوژی گونه شکوفا شده نشان داد که سیست جدا شده متعلق به گونه Dunaliella salina می‌باشد. جهت تائید شناسایی استرین خالص حاصل از کشت سیست مورد­نظر، استخراج DNA و سپس واکنش زنجیره­ای پلی­مراز (PCR) انجام گردید. توالی ژنی گونه D. salina با توالی ژنی گونه­های مشابه از بانک ژن مقایسه گردید. بررسی مولکولی و فیلوژنی گونه نشان­ داد که گونه شکوفا شده از نظر توالی نوکلئوتیدی بیشترین شباهت را با گونه D. salina دارد. همچنین، این مطالعه نشان داد که ‌گونه D. salina از سواحل جنوب ایران توانایی تولید سیست را دارد.