| dc.contributor.author | شریفی, زهره | fa_IR |
| dc.contributor.author | یاری, فاطمه | fa_IR |
| dc.contributor.author | سمیعی, شهرام | fa_IR |
| dc.contributor.author | محمودیان شوشتری, محمود | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 1399-08-23T09:20:22Z | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 2020-11-13T09:20:22Z | |
| dc.date.available | 1399-08-23T09:20:22Z | fa_IR |
| dc.date.available | 2020-11-13T09:20:22Z | |
| dc.date.issued | 2007-11-01 | en_US |
| dc.date.issued | 1386-08-10 | fa_IR |
| dc.identifier.citation | شریفی, زهره, یاری, فاطمه, سمیعی, شهرام, محمودیان شوشتری, محمود. (1386). کلونینگ ژن کدکننده آنتیژن سطحی ویروس هپاتیت B در اشرشیاکولی. مجله علوم پزشکی رازی, 14(56), 109-116. | fa_IR |
| dc.identifier.issn | 2228-7043 | |
| dc.identifier.issn | 2228-7051 | |
| dc.identifier.uri | http://rjms.iums.ac.ir/article-1-780-fa.html | |
| dc.identifier.uri | https://iranjournals.nlai.ir/handle/123456789/596172 | |
| dc.description.abstract | زمینه و هدف: عفونت ویروس هپاتیت B در سراسر جهان آندمیک است. حدود 350 میلیون ناقل ویروس هپاتیت B در جهان وجود دارد. حدود یک میلیون نفر در سال به دنبال عفونت ویروس هپاتیت B تلف میشوند. متاسفانه دارویی که بتواند به درمان کامل هپاتیت B بیانجامد، وجود ندارد و تنها راه جهت کنترل اپیدمیها، انجام واکسیناسیون میباشد. اندازهگیری مقدار DNA ویروسی برای شناسایی افرادی که دارای عفونت مزمن هستند، مورد استفاده قرار میگیرد، همچنین برای بررسی و پیشبینی سیر درمان بیماری و تاثیر داروهای ضد ویروسی در رژیمهای درمانی کاربرد دارد. با معرفی Real-time PCR در آزمایشگاههای تشخیص طبی، اندازهگیری کمی DNA ویروس در نمونههای بالینی به طور معنیداری توسعه پیدا کرده است. هدف از این مطالعه، کلونینگ و شناسایی ژن کدکننده آنتیژن سطحی ویروس هپاتیت B به عنوان استاندارد خارجی است. روش بررسی: این تحقیق یک مطالعه توصیفی میباشد. برای تکثیر ژن S، ابتدا ژنوم ویروس از نمونه سرم که از نظر HbsAg(Hepatitis B surface Antigen) مثبت بود، استخراج شد. سپس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی، قطعهای از ژن S با روش PCR(Polymerase chain reaction) تکثیر شد. برای کلونینگ ژن S از یک کلونینگ وکتور pTZ-57R(فرمنتاس) استفاده گردید. پس از خالصسازی، محصول PCR به داخل وکتور پلاسمیدی کلون شد و به داخل سلول مستعد E.Coli سویه TG1، ترانسفورم شد. باکتری حاوی پلاسمید نوترکیب با روشهای مختلف از قبیل مقاومت به آنتیبیوتیک، PCR، برش با آنزیمهای اختصاصی و در نهایت تعیین توالی، مورد بررسی قرار گرفت. برای آنالیز آماری، از آزمون t و محاسبه میانگین تعداد کلنیهای شمارش شده بر روی پلیتهای حاوی آنتیبیوتیک و بدون آن، استفاده گردید. یافتهها: پس از استخراج DNA ویروسی با استفاده از آغازگرهای اختصاصی، ژن S با روش PCR تکثیر شد و قطعهای شامل 175 جفت باز حاصل گردید، سپس ژن S با استفاده از پلاسمید pTZ57R کلون گردید. پلاسمید نوترکیب استخراج شد و با روش PCR و برش آنزیمی، مورد تایید قرار گرفت. برای تایید نهایی، پلاسمید نوترکیب تعیین توالی شد. نتیجهگیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان میدهد که قطعه 175 جفتبازی ژن S در پلاسمید pTZ57R کلون گردیده است که میتوان از آن، جهت تهیه استاندارد Real-time PCR یا کنترل مثبت در آزمایشها استفاده نمود. | fa_IR |
| dc.format.extent | 296 | |
| dc.format.mimetype | application/pdf | |
| dc.language | فارسی | |
| dc.language.iso | fa_IR | |
| dc.publisher | دانشگاه علوم پزشکی ایران | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | مجله علوم پزشکی رازی | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | Razi Journal of Medical Sciences | en_US |
| dc.subject | 1 – کلونینگ 2 – استاندارد خارجی 3 – اشرشیاکولی 4 – آنتیژن سطحی ویروس هپاتیت B | fa_IR |
| dc.subject | ایمنیشناسی | fa_IR |
| dc.title | کلونینگ ژن کدکننده آنتیژن سطحی ویروس هپاتیت B در اشرشیاکولی | fa_IR |
| dc.type | Text | en_US |
| dc.type | پژوهشي | fa_IR |
| dc.citation.volume | 14 | |
| dc.citation.issue | 56 | |
| dc.citation.spage | 109 | |
| dc.citation.epage | 116 | |