تشخیص سریع ‏blaTEM‏ در ایزوله های کلبسیلا به روش مولکولی‎ PCR

Abstract

سابقه و هدف: اطلاع از وجود ژن های مولد بتالاکتامازهای وسیع الطیف در باکتری هایی چون کلبسیلا از نظر بیماری زایی و نیز میزان شیوع آنها در جوامع، در پیشگیری و درمان عفونت های ناشی از آنها کمک می نماید.هدف از این مطالعه شناسایی سریع ژن مولد blaTEM در کلبسیلا با استفاده از تکنیک PCR می باشد.

مواد و روشها: در این مطالعه مقطعی، از فروردین ماه لغایت مهرماه 1392 تعداد 70 ایزوله باکتری کلبسیلا از نمونه دهای بالینی شامل (زخم، ادرار، خلط و خون) بر اساس تست هاس بیوشیمیایی( وضعیت غیر تخمیری و تولید گاز در محیط TSI، منفی بودن اندول، حرکت و MR، تست اوره آز و VP مثبت) مجزا گردیدند. سپس فراوانی سویه های تولید کننده بتالاکتامازهای وسیع الطیف، باCombined disk تعیین گردید. DNA با روش جوشانیدن استخراج شده و از نظروجود ژن TEM توسط روش PCR مورد بررسی قرار گرفت.

یافته­ ها: از مجموع 70 ایزوله کلبسیلا، در 11 نمونه فنوتیپ بتالاکتاماز وسیع الطیف مشاهده شد که از این تعداد ، 10 نمونه دارای ژن مقاومت بتالاکتاماز TEM بودند. همچنین از 59 نمونه ESBL منفی در آنتی بیوگرام، 9 نمونه (26%) به وسیله تست PCR از جهت ژن blaTEM مثبت تشخیص داده شد.

نتیجه گیری: با توجه به شیوع روزافزون سویه های تولید کننده بتالاکتامازهای وسیع الطیف و تشخیص ضعیف مقاومت آنتی بیوتیکی توسط روش سنتی آنتی بیوگرام، استفاده از تکنیک های دقیق تر از جمله PCR، قویا توصیه می شود.