تأثیر پروبیوتیک‌های بومی بر بیان ژن‌های ضد سرطانی bax/ bcl2 سلولی سرطانی HT-29 با روش Real Time PCR

Abstract

پیش‌زمینه و هدف: سرطان کولورکتال یکی از شایع‌ترین تومورهای بدخیم در انسان است. پروبیوتیک‌ها بر تعادل باکتری‌های مفید و مضر روده تأثیر می‌گذارد و این تعادل را به نفع افزایش جمعیت باکتری‌های مفید و ایجاد اثرات سلامت بخش تغییر می‌دهند. لذا هدف از مطالعه پیش رو؛ تأثیر پروبیوتیک‌های بومی بر بیان ژن‌های ضد سرطانی bax و bcl2 باید سلولی سرطانی HT-29 با روش Real Time PCR است. مواد و روش‌ها: در این مطالعه پس از کشت سلول‌های سرطانی HT-29 و تیمار آن با عصاره پروبیوتیکی استخراج RNA و سنتز cDNA انجام می‌گردد. آزمون Real-Time PCR با استفاده از پرایمرهای مخصوص ژن‌های ضد سرطانی bax و bcl2 در دستگاه corrbet انجام گردید. همچنین آزمون MTT به‌منظور بررسی توکسیسیته عصاره پروبیوتیک بومی انجام گردید. یافته‌ها: آزمون نشان داد که افزایش غلظت عصاره موردمطالعه باعث کاهش زنده ماندن سلول‌ها به‌صورت وابسته به دوز می‌شوند. مقادیر IC50 برای عصاره پروبیوتیکی ug/ml 300 محاسبه شد. همچنین میزان ژن‌های bax و bcl2 در سلول‌های تحت تیمار با سوپرناتانت عاری از سلول لاکتوکوکوس رامنوسوس برابر 344/1 و 447/1 بود که نشان می‌دهد افزایش بیان این دو ژن است. (میزان بیان ژن bax به مقدار 344/1 برابر و میزان بیان ژن bcl-2 به مقدار 447/1 برابر در گروه تیمار نسبت به گروه کنترل افزایش یافت (p<0.05) ذکر مقدار value-p ضروری است). بحث و نتیجه‌گیری: با توجه به سمیت کم عصاره پروبیوتیک در تست MTT و افزایش بیان ژن‌های bax و bcl2، به نظر می‌رسد می‌توان از پروبیوتیک‌ها به‌عنوان مکمل‌های درمانی در پیشگیری و درمان سرطان‌های گوارشی استفاده کرد. این یافته‌ها نشان می‌دهند که پروبیوتیک‌های بومی می‌توانند به‌عنوان یک راهکار نوین درمانی با تأثیر بالا و عوارض جانبی کم برای درمان و پیشگیری از سرطان کولون مورداستفاده قرار گیرند.