القای آلزیم سیتوکروم P4501A1 با بتانفتوفلاون و بررسی برخی از خصوصیات آن در فیل ماهی ( Huso huso )

Abstract

<br /> <br /> <br /> <br /> سیتوکروم P4501A1 مهمترین ایزوآنزیم سیستم مونواکسیژنازی در ماهی است که توسط ترکیبات آروماتیک چند حلقه ای القا می شود. در پژوهش حاضر تاثیر ماده بتانفتوفلاون در القای این ایزوآنزیم در فیل ماهی بررسی گردید و برخی از خواص کینیتیکی این ایزوآنزیم مورد مطالعه قرار گرفت. ماده بتانفتوفلاون به صورت داخل صفاقی به ماهیان تزریق گردید. میزان فعالیت آنزیم سیتوکروم P4501A1 از روی واکنش دی اتیلاسیون سوبسترای 7- اتوکسی رزروفین (EROD) با روش فلورومتری و میزان نسبی پروتئین های القا شده با روش الکتروفورز در ژل پلی اکریل آمید در حضور سدیم دودسیل سولفات (SDS- PAGE) تعیین گردید. نتایج نشان داد که نرخ واکنش در فراکسیون میکروزومی ماهیان تیمار شده 15 تا 26 برابر ماهیان شاهد در شرایط مشابه آزمایش است. اپتیمم فعالیت این آنزیم در دامنه دمای 20 تا 25 درجه سانتیگراد قرار می گیرد و فعالیت آنزیم در غلظت 1.53 میکرومولار از سوبسترا و غلظت 180 میکروگرم پروتئین میکروزومی به حداکثر می رسد. الگوی SDS-PAGE فراکسیون میکروزومی در ماهیان تیمار شده حضور پروتئینی را با وزن مولکولی حدود 58±1 کیلو دالتون نشان می دهد که همان آنزیم سیتوکروم P4501A1 می باشد. بنابراین اثر القایی بتانفتوفلاون موجب القای ژن سیتوکروم P4501A1 و افزایش بیوسنتز این آنزیم می گردد که بصورت افزایش در نرخ فعالیت آنزیم در واکنش EROD نمایانگر می شود.