تعیین تیپ جدایه‌های کلستریدیوم پرفرینجنس جدا شده از گوسفند در منطقه‌ی اهواز

Abstract

کلستریدیوم پرفرینجنس باکتری پاتوژن مهمی است که باعث بیماری‌های مختلفی در دام‌ها می-‏شود. این باکتری در 5 تیپ ‏A، ‏B، ‏C، ‏D‏ و ‏E‏ طبقه‌بندی می‌شود. تیپ ‏D‏ کلستریدیوم ‏پرفرینجنس عامل ایجاد بیماری آنتروتوکسمی در دام‌ها است. هدف از این مطالعه تعیین تیپ-‏های مختلف کلستریدیوم پرفرینجنس در منطقه‌ی اهواز بود. 369 نمونه مدفوع به صورت ‏تصادفی از گوسفندان این منطقه، جمع‌آوری گردید. پس از آماده‌سازی و کشت نمونه‌ها در ‏محیط آگار خون‌دار حاوی نئومایسین، باکتری‌های مظنون به کلستریدیوم پرفرینجنس با استفاده ‏از روش‌های مورفولوژیکی و بیوشیمیایی تعیین هویت شدند. درمجموع از 369 نمونه مدفوع ‏جمع‌آوری شده، با استفاده از روش‌های مورفولوژیکی و بیوشیمیایی، تعداد 56 جدایه مظنون به ‏کلستریدیوم پرفرینجنس جداسازی و شناسایی گردید. برای تایید مولکولی جدایه ها، ‏DNA‏ این ‏جدایه‌ها استخراج و با استفاده از پرایمر‌های اختصاصی توکسین آلفا، تأیید مولکولی جدایه‌ها با ‏PCR‏ صورت گرفت. نتایج نشان داد که از 56 جدایه کلستریدیوم پرفرینجنس، 54 جدایه به ‏عنوان کلستریدیوم پرفرینجنستأیید ملکولی شدند. تعیین تیپ این جدایه‌ها با استفاده از ‏پرایمرهای اختصاصی اگزوتوکسین‌های پنج‌گانه‌ی تیپ‌های مختلف این باکتری صورت ‏پذیرفت. نتایج نشان داد که از مجموع 54 جدایه، به ترتیب 10 (52/18%)، 4 (41/7%)، 24 ‏‏(44/44%) و 16جدایه (63/29%)، تیپA، تیپB، تیپC ‎‏ و تیپD‏ می‌باشند. بنابراین شایع‌ترین ‏تیپ‌های این باکتری در این منطقه تیپ‌های ‏C‏ وD ‎‏ هستند. در این مطالعه، هیچ‌یک از جدایه‌ها ‏واجد ژن توکسین یوتا و نیز ژن آنتروتوکسین نبودند.‏