القای جنین زایی میکروسپور در گوجه فرنگی (Lycoporsicum esculontum Mill) رقم میکروتوم

Abstract

روش به نژادی هاپلوییدی کارآمدترین و سریع ترین روش جهت تهیه لاین های خالص می باشد. در این تحقیق، روش کشت میکروسپور به منظور توسعه پروتکل جنین زایی مطالعه گردید. اثر تنش های مختلف شامل سرما، گرما، گرسنگی و کلشیسین بر روی القای جنین زایی میکروسپور بررسی شد. میکروسپورها در مراحل مختلف نموی از غنچه های گل ضدعفونی شده، جدا گردیده و در محیط AT3 یا B، با و یا بدون کلشی سین، در درجه حرارت های مختلف و زمان های متفاوت کشت شدند. بعد از اعمال تنش، میکروسپورها به محیط تغییر یافته AT3 تکمیل شده با تنظیم کننده های رشدی انتقال یافته و در دمای 25 درجه سانتی گراد و شرایط تاریکی نگهداری شدند. نتایج نشان داد که مرحله نموی انتهای تک هسته ای میکروسپور، محیط B و روش همزن مغناطیسی به ترتیب مناسب ترین مرحله، محیط و روش جداسازی میکروسپورها بودند، ضمنا تیمار کلشی سین (25mM) به همراه تنش درجه حرارت پایین (4oC) به مدت 72 ساعت باعث القا جنین زایی و تقسیمات اسپوروفیتی در بیش از 35 درصد از میکروسپورهای کشت شده و نهایتا تشکیل کالوس و ساختارهای جنینی گردید.