انتقال ژن AtEXPB2 به گیاه توتون (Nicotiana tabacum) با هدف افزایش تحمل به تنش خشکی

Abstract

تقسیم و توسعة یاخته‌ای دو فرایند اصلی در رشد گیاه به‌شمار می­آیند. پروتئین­های اکسپنسیندر فرایند توسعة یاخته‌ای نقش کلیدی دارند. این پروتئین­ها با فعالیت غیرآنزیمی در بسیاری از فرایندهای رشد و نمو گیاهی نقش دارند. یکی از نقش­های عنوان‌شده برای این پروتئین­ها، تأثیر در افزایش تحمل گیاه به خشکی است. ژن <em>EXPB2</em> یکی از ژن­های خانوادة اکسپنسین است که بیشتر در بافت ریشه بیان می­شود، هدف از این تحقیق انتقال ژن <em>EXPB2</em> علف تال یا گوشی موشی‌ (Arabidopsis Thaliana) به گیاه توتون است. انتقال سازة ژنی <em>pBI;EXPB2</em><em>، </em>با استفاده از آگروباکتریوم انجام شد. گزینش اولیة گیاهان تراریخته (تراژن)، با کشت ریزنمونه­های برگی تلقیح‌شده با آگروباکتریوم، در محیط کشت حاوی کانامایسین انجام شد. گیاهچه­های متحمل به پادزیست (آنتی­بیوتیک) کانامایسین، به خاک منتقل شدند. رگه (لاین)­های تراریخته با استفاده از واکنش زنجیره­ای پلیمراز(PCR) تأیید شدند. گیاهان تراریخته ریشه­زایی خوبی نشان دادند که بیانگر اثر این ژن بر افزایش طول و تراکم ریشه بود. در نهایت گیاهان به‌دست‌آمده صفات نامطلوب از جمله ریزش غنچه­های گل و ریزش برگ داشتند که به احتمال نشان‌دهندة آن است که بیان این ژن در بخش­های هوایی گیاه می­تواند صفات نامطلوبی ایجاد ­کند.