همسانه‌سازی عامل رونویسی WDREB2گندم در ناقل بیان pBI121 و انتقال به گوجه‌فرنگی به‌منظور ایجاد تحمل به تنش سرما

Abstract

تنش‌های غیرزیستی از قبیل خشکی و سرما، تأثیرات مضری بر رشد و عملکرد گیاهان دارند و تحمل به آنها از جمله اهداف اصلی اصلاح گیاهان بوده است. افزایش تحمل به چند تنش با استفاده از انتقال یک ژن تنظیمی مانند عوامل رونویسی که در مسیر‌های تنظیمی متعددی دخالت دارند، ممکن است. تحقیقات انجام‌گرفته تاکنون حاکی از موفقیت در افزایش تحمل به تنش‌های غیرزنده با استفاده از عوامل تنظیمی بوده است. این پژوهش با هدف همسانه‌سازی ایزوفرم آلفا ژن <em>WDREB2</em> در ناقل بیان مناسب گیاهی و انتقال این ژن به گیاه گوجه‌فرنگی به‌منظور بهبود تحمل به تنش سرما انجام گرفت. عامل رونویسی <em>WDREB2</em> یکی از عوامل رونویسی مهم در گندم بوده و در تحمل به تنش‌های غیرزیستی مؤثر است. همسانه‌سازی ژن <em>WDREB2</em> در ناقل بیانpBI121 و انتقال این ژن به گیاه گوجه‌فرنگی توسط <em> </em><em>tumefaciens</em> <em>Agrobacterium</em>سویۀ C58 انجام گرفت. به‌منظور تأیید تراریختی گیاهان گوجه‌فرنگی استخراج DNA و واکنش PCR با آغازگرهای اختصاصی انجام گرفت. وجود قطعۀ مربوط به ژن <em>WDREB2</em>، تراریختی گیاهان گوجه‌فرنگی را تأیید می‌کند. تأیید بیان ژن <em>WDREB2</em> با استفاده از تکنیک RT PCR پس از استخراج RNA و سنتز cDNA صورت گرفت. زیست‌سنجی گیاهان تراریخت و شاهد با تیمار گیاهان در دمای4 درجۀ سانتی‌گراد به‌منظور اعمال تنش سرما انجام گرفت. مقایسۀ علائم فنوتیپی تنش سرما بین گیاهان شاهد و تراریخت، نقش این ژن را در القای تحمل تأیید می‌کند.