جداسازی، شناسایی و تعیین بیوتیپ یرسینیا انتروکولیتیکای بیماری‌زا از شیرهای پاستوریزه

Abstract

به منظور بررسی وجود سویه­های بیماری­زای <em>یرسینیا انتروکولیتیکا</em> در شیر پاستوریزه، طی سال­ 1390 تعداد 242 نمونه شیر پاستوریزه عرضه شده در تبریز جمع­آوری گردید. نمونه­ها در محیط PSBB غنی­سازی شد و از ژن­های <em>ail</em> و <em> </em><em>virF</em>به عنوان توالی­های هدف برای ردیابی سویه­های بیماری­زای <em>یرسینیا انتروکولیتیکا</em> در نمونه­های غنی­ شده استفاده گردید. از نمونه­های مثبت در آزمایش PCR در محیط CIN آگار وMacConkey آگار کشت داده شد و پرگنه­های مشکوک با duplex-PCRتأیید گردید. جهت تعیین بیوتیپ <em>یرسینیا انتروکولیتیکا</em>،جدایه­ باکتری به وسیله آزمون­های بیوشیمیایی مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین شمارش تعداد <br /> باکتری­های شاخص بهداشتی و آزمون کیفی فسفاتاز قلیایی (ALP) بر روی نمونه­های شیر پاستوریزه انجام یافت. <em>یرسینیا انتروکولیتیکای</em> بیماری­زا در 61/6% (16 نمونه) از نمونه­های شیر پاستوریزه با روش <em>ail</em>-PCR ردیابی گردید. در حالی که 13/4% (10 نمونه) از نمونه­ها با روش <em>virF</em>-PCRمثبت تشخیص داده شد. از بین نمونه­های مثبت در آزمایش PCR، فقط 41/0% (1 نمونه) به وسیله کشت جداسازی و با duplex-PCR تأیید گردید. بر اساس آزمایش­های بیوشیمیایی، جدایه <em>یرسینیا انتروکولیتیکا </em>ازنوع بیوتیپ 4 تعیین گردید<em>. </em>طبق نتایج مطالعه، 57/11% (28 نمونه) از نمونه­های شیر پاستوریزه ALP مثبت بودند و تعداد باکتری­های شاخص بهداشتی در این نمونه­ها در قیاس با نمونه­های ALP منفی تفاوت معنی­دار (01/0>p) نشان داد. با توجه به حساسیت زیاد <em>یرسینیا انتروکولیتیکا</em> نسبت به حرارت پاستوریزاسیون، لذا آلودگی ثانویه می­تواند دلیل اصلی حضور <em>یرسینیا انتروکولیتیکای </em>زنده در شیر پاستوریزه باشد.