تخلیص فا کتور فعال کنندة V انعقاد خون از زهر افعی لبتینای ایران

Abstract

<strong>زمینه و هدف: </strong>زهر مارهای ویپریده (افعی­ها) حاوی پروتئین­هایی می­باشند که روی انعقاد خون اثر می­گذارند. هدف از این مطالعه، تشخیص و جداسازی فعال­کنندة فاکتور خونی انعقادی V از زهر افعی لبتینای ایران می­باشد. <strong>روش بررسی: </strong>فعال­کنندة فاکتور V از 200 میلی­گرم زهر خام به وسیلة سه مرحله کروماتوگرافی: ژل فیلتراسیون روی سفادکس G100، کروماتوگرافی تعویض یون روی DEAE – سلولز و کروماتوگرافی میل ترکیبی روی هپارین آگاروز تخلیص شد. اثر فعال­کنندة فاکتور V روی فاکتور V انسانی به وسیلة فعالیت امیدولیتیک­ترومبین تولید شده به وسیلة فاکتور V فعال شده ((Va بررسی شد. <strong>یافته­ ها:</strong> فعال­کنندة فاکتور V تخلیص­شده یک باند پروتئینی را به وسیلة الکتروفورز روی سدیم دودسیل­سولفات ژل الکتروفورز ( (SDS - PAGE نشان داد. وزن مولکولی آن در حدود kDa 29 تخمین زده شد. این فاکتور، در حضور یون کلسیم فاکتور V را به فاکتور Va تبدیل می­کند. فعالیت ارژینین استرهیدرولازی روی سوبسترای BAEE ( - بنزوئیل ­ارژینین ­اتیل استر) دارد. فعالیت امیدولیتیک ضعیفی روی سوبسترای S-2222 (بنزوئیل – ایزولوسیل- گلوتامیل - گلیسیل - ارژینیل پارانیتروانیلید ) نشان می­دهد. <strong>نتیجه­ گیری:</strong> با توجه به نتایج به­دست آمده به نظر می­رسد که فاکتور تخلیص شده برای فاکتور V اختصاصی می­باشد.