بررسی چند‌شکلی اگزون چهارم ژن کاپاکازئین در گوسفند نژاد ماکویی با استفاده از روش PCR-SSCP

Abstract

تحقیق حاضر به منظور شناسایی چندشکلی موجود در ناحیه اگزون چهارم ژن کاپاکازئین گوسفند نژاد ماکویی با استفاده از روش چندشکلی فضایی رشته‌های منفرد مبتنی بر واکنش زنجیره‌ای پلی مراز انجام شد. برای این منظور از صد رأس گوسفند مرکز اصلاح نژاد گوسفند ماکویی، بطور تصادفی خونگیری انجام شد. استخراج DNA با استفاده از کیت آماده فرمنتاز انجام گرفت. یک جفت آغازگر اختصاصی جهت تکثیر قطعه 459 جفت بازی از ناحیه اگزون چهارم این ژن به کمک واکنش زنجیره‌ای پلی مراز (PCR) بکار برده شد. نمونه‌های DNA استخراجی و نمونه‌های حاصل از واکنش زنجیره‌ای پلی مراز به ترتیب با استفاده از ژل‌های آگارز یک درصد و آگارز دو درصد تعیین کیفیت شدند. در نهایت نمونه‌های تکثیر شده با استفاده از روش چندشکلی فضایی رشته‌های منفرد (SSCP) تعیین ژنوتیپ شدند که در تمامی نمونه‌های بررسی شده تنها یک شکل مشاهده شد. با توجه به یکسان بودن ژنوتیپ نمونه-های بررسی شده در این تحقیق هیچ جهشی مورد تأیید قرار نگرفت. عدم مشاهده چندشکلی احتمالاً می‌تواند به دلیل عدم آمیزش با سایر نژاد‌ها، بسته بودن محیط پرورش و کوچک بودن تعداد نمونه‌های بررسی شده باشد.