مقاله علمی – پژوهشی:‌ جداسازی، تکثیر و انتقال ژن VP28 ویروس عامل لکه سفید میگو در میکروجلبک Chlorella vulgaris به روش الکتروپوریشن (تراواسازی الکتریکی)

Abstract

بیماری لکه‌سفید یکی از مهمترین بیماری‌ها در پرورش میگو می‌باشد که موجب کاهش تولید و خسارت اقتصادی شدیدی در کل دنیا از جمله ایران گردیده است. مرگ ‌و میر ناشی از این بیماری شدید و بسیار بالا و به 100% طی 10-3 روز از شروع بیماری می‌رسد. بر اساس آمارهای جهانی سالانه در دنیا حدود 300 هزار تن میگو بر اثر این بیماری تلف می‌شود. برای مثال، در ایران در سال های 1386,1383, 1394,1387، 1395 و 1398 شیوع این بیماری خسارات میلیاردی به تولید کنندگان وارد کرد. با توجه به این‌که ژن پروتئین ویروسی VP28 یکی از مهم‌ترین پروتئین‌‌های پوششی ویروس بیماری لکه سفید و در چسبیدن و نفوذ به سلول‌های میگو نقش دارد و از آن‌جایی‌که مهم‌ترین منبع غذایی میگو در مرحله لاروی میکروجلبک می‌باشد، می‌تواند منبع مناسبی برای ساخت واکسن باشد. در این تحقیق ژن VP28 به میکروجلبک انتقال داده شد تا از این راه کمکی در جهت تولید واکسن خوراکی برای جلوگیری از بیماری لکه‌‌سفیدمیگو انجام گیرد. در این تحقیق نمونه‌های میگو (Penaeus indicus) مشکوک به بیماری سندروم لکه سفید از استخرهای پرورشی آبادان (مهرماه 1390) به آزمایشگاه مؤسسه واکسن و سرم‌سازی رازی-شعبه اراک منتقل و DNA ژنومیک ویروس با استفاده از روش پروتئیناز K و فنل/کلرفرم استخراج شد. با طراحی آغازگرهای اختصاصی ژن VP28 به روش PCR تکثیر و به داخل وکتور pCAMBIA1304 منتقل و نهایتاً طی فرایند تراواسازی الکتریکی به میکروجلبک Chlorella vulgaris که خود یکی از میزبان‌های بسیار مناسب انتقال ژن می‌باشد، منتقل گردید.