ارزیابی تأثیر بیان افزایشی هومئودومین پروتئین TGIF2LX بر روی تغییرات بیان miRNA‌های انکوژن در رده‌ی سلولی سرطان روده بزرگ SW1116

Abstract

مقدمه: پروتئین القا شونده توسط فاکتور رشد ترانسفورم‌کننده بتا مرتبط با X (TGIF2LX) به‌عنوان یک هومئودومین پروتئین و کورپرسور فاکتور رشد ترانسفورم‌کننده بتا (TGF-β)، تکثیر برخی سلول‌های سرطانی از جمله سرطان روده بزرگ را به‌واسطه‌ی برخی مسیرهای پیام‌رسانی تنظیم می‌کند. NA‌های غیرکدکننده کوچک(micro RNA; miRNA) به‌عنوان تنظیم‌کننده‌های مولکولی سرطان روده بزرگ شناخته می‌شوند که در فرآیندهای رشد، تکثیر، تمایز و آپوپتوز سلولی نقش دارند. هدف از این مطالعه ارزیابی اهمیت بیولوژیکی پروتئین TGIF2LX و تأثیر آن بر میزان بیان miRNA‌های انکوژن miR-34a، miR-20a و miR-21 در سلول‌های رده سرطانی روده بزرگ SW1116 بود. مواد و روش‌ها : رده سلولی SW1116 انسان و رده سلولی ترانسفکت شده با cDNA کدکننده ژن TGIF2LX و بیان‌کننده افزایشی این فاکتور، در محیط کشت RPMI 1640 در شرایط مناسب کشت شدند. برای ارزیابی میزان حیات سلول‌ها در in vitro از آزمون MTT استفاده شد. پس از استخراج RNA از هر دو گروه سلولی و سنتز cDNA، تجزیه و تحلیل بیان miRNA‌ها با استفاده از تکنیک qRT-PCR انجام شد. نتایج: نتایج نشان داد بیان افزایشی TGIF2LX می‌تواند تکثیر رده سلولی SW1116 را کاهش دهد. تجزیه و تحلیل بیان ژن نشان داد بیان افزایشی TGIF2LX می‌تواند سطح بیان miR-21 را به‌طور معناداری کاهش دهد (026/0P=). با این حال سطح بیان miR-34a (52/0P=) وmiR-20a (48/0P=) در سلول‌هایSW1116 ترانسفکت شده باTGIF2 LX در مقایسه با سلو‌ل‌های دستکاری نشده تغییر معناداری نشان نداد. نتیجه‌گیری: یافته‌های ما شواهدی از مکانیسم‌های مولکولی را ارايه داد که هومئودومین پروتئین TGIF2LX می‌تواند با کاهش بیان miR-21 به‌عنوان سرکوب‌کننده تومور در سلول‌های سرطان روده بزرگ عمل کند. بنابراین، به‌طور بالقوه می‌توان این پروتئین را به‌عنوان یک گزینه امیدوارکننده برای استراتژی‌های درمانی مبتنی‌بر ژن در این سرطان مدنظر قرار داد.