بررسی بیان ژن VPR2 در سلولهای AGS ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب حامل ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری

Abstract

زمینه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری با پیشرفت سرطان معده ارتباط دارد. آنزیم تیول پروکسیداز که در این باکتری توسط ژن tagD رمزگذاری می‌شود، نقش مهمی را در اتصال باکتری و کلونیزاسیون آن در معده انسان بازی می‌کند. هدف از این تحقیق بررسی بیان ژن VPR2 در سلول‌های AGS ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب حامل ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری است. روش کار: در این پژوهش، سلول‌های AGS در محیط RPMI-1640 دارای 10% سرم جنین گاوی و در شرایط استاندارد کشت داده شدند. این سلول‌ها با وکتور نوترکیب PFLAG-CMV-3-tagD یا وکتور خالی PFLAG-CMV-3 به عنوان کنترل، ترانسفکت شدند. RNA کامل سلول استخراج شد و سنتز cDNA صورت پذیرفت. سپس با روش real time RT-PCR میزان بیان ژن VPR2 در هر دو گروه سلول‌های AGS ترانسفکت شده تست و کنترل، بررسی شد. در نهایت با استفاده از نرم افزار SPSS و آزمون‌های آماری t-test Indepent بیان هر یک از ژن‌ها مورد بررسی قرار گرفت. یافته‌ها: بیان یوکاریوتی ژن tagD در سلول‌های AGS دریافت کننده ژن tagD با انجام آزمایش RT-PCR تایید شد. بیان ژنهای VPR2 در سلول‌های AGS دریافت کننده ژن tagD نسبت به سلول‌های کنترل به صورت معنی‌داری افزایش نشان داد (0203/0p= ). نتیجه‌گیری: براساس یافته‌های حاصل، می‌توان نتیجه گرفت که ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری، با اثر بر سلول‌های AGS، می‌تواند سبب کاهش یا افزایش بیان در این سلول‌ها گردد. ژن tagD یکی از ژن‌های مهم هلیکوباکتر پیلوری است که می‌تواند بر روی سلول‌های میزبان تأثیر بگذارد.