بررسی تأثیر انجماد سریع بر بیان ژن‌های SPAG5 و SPAG9 اسپرم انسانی

Abstract

سابقه و هدف: آنتی‌ژن‌های اختصاصی اسپرم (SPAG)، نقش مهمی در بروز سرطان‌های مختلف، مانند سرطان سینه، ریه، کبد و مثانه دارند. همچنین SPAGها اهمیت بالایی در عملکردهای اسپرم، همچون تحرک دارند. با این‌حال به‌نظر می‌رسد انجماد اسپرم به‌عنوان یکی از روش‌های کمک‌باروری می‌تواند بر بیان این ژن‌ها تأثیرگذار باشد. هدف مطالعه حاضر، ارزیابی اثر انجماد، بر بیان SPAGهای 5 و 9 اسپرم انسانی می‌باشد. مواد و روش‌ها: در مطالعه تجربی حاضر، 12 نمونه نرمال از نظر پارامترهای طبیعی اسپرم، از منی مردان مراجعه‌کننده به پژوهشگاه رویان جمع‌آوری گردید و با روش سانتریفیوژ گرادیان، غلظت اسپرم‌های دارای تحرک مؤثر بالا جداسازی شد. نمونه‌ها به دو گروه غیرانجمادی (گروه کنترل) و گروه انجمادی تقسیم شدند. پس از انجماد به روش سریع و نگهداری برای سه روز در تانک نیتروژن، نمونه‌ها زیر شیر آب سرد ذوب شدند و به­مدت دو ساعت در انکوباتور دارای CO2 قرار گرفتند. استخراج RNA در هر دو گروه با استفاده از ترایزول صورت گرفت و ارزیابی ژن‌های SPAG9 و SPAG5 با روش Real-time PCR انجام شد. نتایج: براساس تجزیه و تحلیل آماری، بیان SPAG5 در گروه انجمادی نسبت به گروه کنترل کاهش معنی‌داری داشت (05/0P≤)؛ در مقابل تفاوت معنی‌داری در بیان ژن SPAG9 بین گروه کنترل و انجمادی مشاهده نشد. نتیجه‌گیری: با در نظر گرفتن شوک حاصل از سرما در آینده سلول، کاهش بیان معنی‌دار SPAG5 در گروه انجمادی می‌تواند بیانگر بروز اثرات احتمالی آن در جنین حاصل باشد.