| dc.contributor.author | راسخی, مهسا | fa_IR |
| dc.contributor.author | بخشنده, بهناز | fa_IR |
| dc.contributor.author | صادقی زاده, مجید | fa_IR |
| dc.contributor.author | سلیمی , علی | fa_IR |
| dc.contributor.author | سلیمانی , مسعود | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 1399-08-24T03:25:23Z | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 2020-11-14T03:25:24Z | |
| dc.date.available | 1399-08-24T03:25:23Z | fa_IR |
| dc.date.available | 2020-11-14T03:25:24Z | |
| dc.date.issued | 2018-01-01 | en_US |
| dc.date.issued | 1396-10-11 | fa_IR |
| dc.identifier.citation | راسخی, مهسا, بخشنده, بهناز, صادقی زاده, مجید, سلیمی , علی, سلیمانی , مسعود. (1396). تولید رده نوترکیب HEK293T با بیش- بیانی پایدار miR-1 به‌عنوان مدل زیستی برای مطالعات قلبی. زیست‌فناوری مدرس, 9(1), 1-8. | fa_IR |
| dc.identifier.issn | 2322-2115 | |
| dc.identifier.issn | 2476-6917 | |
| dc.identifier.uri | http://biot.modares.ac.ir/article-22-13983-fa.html | |
| dc.identifier.uri | https://iranjournals.nlai.ir/handle/123456789/664094 | |
| dc.description.abstract | اهداف: القای مصنوعی بیش- بیان miRNA راهکار مناسبی برای القای موثرتر تمایز سلولی است. نقش موثر miR-۱ در تکوین و تمایز سلول‌های قلبی گزارش شده است. لنتی‌ویروس یک ناقل کارآمد برای تهیه رده‌های سلولی پایدار است. هدف پژوهش حاضر تولید رده سلولی با بیش- بیان پایدار miR-۱ برای ایجاد یک مدل زیستی برای مطالعات قلبی بود.
مواد و روش‌ها: در پژوهش تجربی حاضر، سلول‌های HEK ۲۹۳T در محیط کشت DMEM به‌همراه سرم جنین گاوی (FBS) ۱۰% و ال- گلوتامین ۲میلی‌مولار و پنی‌سیلین- استرپتومایسین ۱X در محیط انکوباتور کشت داده شدند. پس از کلون‌کردن ژن miR-۱، کلون‌های نوترکیب انتخاب شدند و حضور قطعه ژنی در وکتور نوترکیب با توالی‌یابی تایید شد. وکتور حامل miR-۱ به‌همراه وکتورهای کمکی در سلولHEK۲۹۳T به‌صورت ویروس نوترکیب بسته‌بندی شد. تراآلایی سلول‌های HEK۲۹۳T با ویروس نوترکیب برای تولید رده پایدار انجام شد. سپس کارآیی تراآلایی و رقت موثر ویروس با نشانگر GFP سنجش شد. تغییرات بیان miR-۱ با روش qPCR بررسی شد. تحلیل داده‌ها از طریق بررسی مقایسه‌ای چرخه آستانه و روش Pfaffl انجام گرفت.
یافته‌ها: بیشترین میزان بیان GFP مربوط به سلول‌های آلوده‌شده با رقت ۱۵۰میکرومولار بود. نشانگر فلورسنت GFP موجب تسهیل فرآیند بهینه‌سازی و تخلیص سلول‌های نوترکیب شد. در ارزیابی qPCR، بیان miR-۱ در سلول‌های تراآلایی شده در مقایسه با سلول‌های گروه کنترل افزایش قابل ملاحظه‌ای داشت.
نتیجه‌گیری: رده سلولی پایدار نوترکیب HEK۲۹۳T بیش- بیان‌کننده miR-۱ در لنتی‌ویروس، به‌عنوان مدل زیستی مناسب برای بررسی فرآیندهای تکامل و تکوین قلب است. | fa_IR |
| dc.format.extent | 1073 | |
| dc.format.mimetype | application/pdf | |
| dc.language | فارسی | |
| dc.language.iso | fa_IR | |
| dc.publisher | دانشگاه تربیت مدرس | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | زیست‌فناوری مدرس | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | Modares Journal of Biotechnology | en_US |
| dc.subject | microRNA-1 | fa_IR |
| dc.subject | سلول‌های HEK293T | fa_IR |
| dc.subject | تمایز سلولی | fa_IR |
| dc.subject | تراآلایی ویروسی سلول | fa_IR |
| dc.subject | مدل زیستی | fa_IR |
| dc.title | تولید رده نوترکیب HEK293T با بیش- بیانی پایدار miR-1 به‌عنوان مدل زیستی برای مطالعات قلبی | fa_IR |
| dc.type | Text | en_US |
| dc.contributor.department | پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه بیوتکنولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه تهران، تهران، ایران | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه ژنتیک، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران | fa_IR |
| dc.contributor.department | مرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه‌اله(عج)، تهران، ایران | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه هماتولوژی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران | fa_IR |
| dc.citation.volume | 9 | |
| dc.citation.issue | 1 | |
| dc.citation.spage | 1 | |
| dc.citation.epage | 8 | |
